[發明專利]一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法

在審

• 申請號: 202010217211.6
• 申請日: 2020-03-25
• 公開（公告）號: CN111206006A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 賴水明;張志榕;范格成;吳賢峰;吳有林
• 申請（專利權）人: 福建傲農生物科技集團股份有限公司;南昌傲農生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/36;C12Q1/04;C12R1/01
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 吳文濱

1.一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1)對糞腸球菌菌苔進行預處理；

2)從步驟1)中挑選優勢菌落并進行多次極限溫度液體培養及平板菌落篩選，即得到耐高溫糞腸球菌；

步驟2)中，所述的極限溫度為49-51℃。

2.根據權利要求1所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，步驟1)中，預處理過程為：

1-1)從菌種斜面上挑選菌苔并接種于液體培養基中，之后在49-51℃靜置厭氧培養45-50h；

1-2)將液體培養基劃線接種于固體培養基上，之后在35-40℃厭氧培養45-50h。

3.根據權利要求2所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，步驟2)中，極限溫度培養過程為：將優勢菌落接種于液體培養基中，之后在49-51℃靜置厭氧培養45-50h。

4.根據權利要求3所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，步驟2)中，平板菌落篩選過程為：將液體培養基劃線接種于固體培養基上，之后在35-40℃厭氧培養45-50h。

5.根據權利要求4所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，所述的液體培養基及固體培養基均為改良MRS培養基。

6.根據權利要求5所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，所述的液體培養基包括以下組分：蛋白胨9-11g/L、牛肉膏9-11g/L、酵母浸粉4-6g/L、乙酸鈉4-6g/L、檸檬酸二胺1.5-2.5g/L、磷酸氫二鉀1.5-2.5g/L、吐溫80 0.5-1.5g/L、硫酸鎂0.3-0.8g/L及硫酸錳0.2-0.3g/L。

7.根據權利要求6所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，所述的液體培養基的pH值為7-7.5。

8.根據權利要求5所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，所述的固體培養基包括以下組分：蛋白胨9-11g/L、牛肉膏9-11g/L、酵母浸粉4-6g/L、乙酸鈉4-6g/L、檸檬酸二胺1.5-2.5g/L、磷酸氫二鉀1.5-2.5g/L、吐溫80 0.5-1.5g/L、硫酸鎂0.3-0.8g/L、硫酸錳0.2-0.3g/L及瓊脂15-20g/L。

9.根據權利要求1所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，步驟2)中，進行極限溫度液體培養及平板菌落篩選的次數為3-5次。

10.根據權利要求1所述的一種耐高溫糞腸球菌的篩選與馴化方法，其特征在于，步驟2)中，所述的極限溫度為50℃。