[發明專利]一種低限度卡格列凈雜質的檢測方法

有效

• 申請號: 202010216914.7
• 申請日: 2020-03-25
• 公開（公告）號: CN111487334B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 朱葉芬;趙琛;陳蓓;胡楚紅
• 申請（專利權）人: 杭州華東醫藥集團新藥研究院有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種低限度卡格列凈雜質的檢測方法，該低限度雜質為基因毒性雜質F。該方法采用高效液相色譜?質譜聯用的分析方法，用[M+NH₄⁺]作為母離子，在稀釋劑中加入乙酸銨，并以揮發性的乙酸銨溶液和乙腈為流動相，更高效地分離并檢測出基因毒性雜質F。該方法專屬性強、靈敏度高、結果準確且操作簡單，對卡格列凈的質量控制及用藥安全具有重要的意義。

技術領域

本發明屬于醫藥分析技術領域，具體涉及一種低限度卡格列凈雜質的檢測方法。

背景技術

卡格列凈，英文名為Canagliflozin，是由強生原研的強效、可逆的高選擇性人體腎臟鈉葡萄糖共轉運體(SGLT2)抑制劑，通過抑制腎臟對葡萄糖的重吸收作用，促進葡萄糖經尿液排泄，從而降低血糖。其半水合物的化學名為(1S)-1,5-脫水-1-[3-[[5-(4-氟苯基)-2-噻吩基]甲基]-4-甲基苯基]-D-葡萄糖醇半水合物，分子式為C₂₄H₂₅FO₅S·1/2H₂O，分子量為453.5，結構式如下：

2013年3月29日美國食品和藥物管理局(簡稱FDA)批準了卡格列凈片，規格為0.1g、0.3g，商品名為INVOKANA。2013年9月12日卡格列凈片獲得澳大利亞藥物管理局(簡稱TGA)批準，并于同年9月20日獲得歐盟藥品局(簡稱EMA)批準。

基因毒性雜質F是卡格列凈的氧化降解雜質，具體為噻吩基相鄰的亞甲基上氧化產生了一個氫過氧基(-O-OH)，該基團具有遺傳毒性。因此必須嚴格控制雜質F的殘留。

但是，國內外藥典均尚未收錄該雜質的質量標準。根據歐洲藥典管理局(EMEA)發布的《遺傳毒性雜質限度指導原則》的規定，按照毒理學擔憂閾值(TTC)作為評價大部分遺傳毒性雜質的閾值，則遺傳毒性雜質攝入量最大限值為1.5μg/天。按照卡格列凈最大劑量300mg/天計，該雜質的控制限度為5ppm。常規的氣相及液相檢測方法均無法滿足此檢測限要求。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術不能檢測基因毒性雜質F的方法，提供一種卡格列凈基因毒性雜質的檢測方法。

為了實現上述目的所采取的具體技術方案為：

一種低限度卡格列凈雜質的檢測方法，包括以下步驟：卡格列凈樣品經稀釋劑稀釋后，采用高效液相色譜-質譜聯用儀，以乙腈和乙酸銨水溶液作為流動相洗脫；

所述低限度卡格列凈雜質為基因毒性雜質F，其化學式為：

其中，所述質譜采用的離子模式為正離子模式；所用離子對為：m/z 494.2380.9，m/z 494.2222.9。

流動相中需要含有乙酸銨或其他可以產生[M+NH₄⁺]的溶劑。所述乙酸銨等溶劑可以產生494.1380.9與494.2222.9的離子對，或者其他具有更好響應性的離子對。

其中，所述流動相中乙酸銨水溶液的體積比為30～70％。

作為優選，所述流動相中乙腈和乙酸銨水溶液的比例具體為：

流動相中乙酸銨水溶液比例在30～70％時，可以在保證分離效率的同時，減少拖尾與分離時間。其中流動相可以是等度也可以是梯度的。乙酸銨水溶液比例可以是30％、45％、50％、55％、70％，也可以在上述比例中變化。在一具體實施例中使用了上述表格的梯度流動相。在具體實施過程中，可根據雜質F的濃度以及溫度等條件進行一定程度的調整。