[發明專利]一種用于檢測鈣需求相關基因SNP位點的試劑盒及應用

有效

• 申請號: 202010212007.5
• 申請日: 2020-03-24
• 公開（公告）號: CN111206091B
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 蘇震;陳春寶;張子詢
• 申請（專利權）人: 海南主健細胞分子遺傳醫學檢驗中心有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6869
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 文小花

本發明提供一種用于檢測鈣需求相關基因SNP位點的試劑盒及應用，該試劑盒包括用于檢測鈣需求相關的GC基因RS2282679位點、IL?6基因RS1800795位點、PTH基因RS6254位點、VDR基因RS1544410位點和VDR基因RS2228570位點的引物組合物，包括5對PCR引物和5個正向延伸引組合物，如SEQ ID No:1?15所示，本發明不僅能夠快速同步檢測多個SNP位點,對與鈣需求相關的基因SNP位點進行有效的基因分型，而且有效提高了多數量的SNP位點在一個反應體系中分型的準確性且檢測限低，實現快速而準確地給出鈣質補充的指導意見。

技術領域

本發明涉及基因多態性檢測技術領域，特別涉及一種用于檢測鈣需求相關基因SNP位點的試劑盒及應用。

背景技術

鈣是人體內含量最多的礦物元素，廣泛存在于身體的各個部分。絕大多數鈣元素沉積于骨骼和牙齒中，既組成人體的支架，又是機體內鈣元素的儲存庫，而只有1％的鈣存在于人體的軟組織、細胞外液及血液中。軟組織和血液中的鈣又叫“混合鈣池”，與骨骼中的鈣保持著動態平衡，完成多種生理功能，鈣在神經沖動的傳遞、神經與肌肉應激、血液凝固、心跳節律的維持、人體代謝酶的激活等許多生理過程中起重要的作用。

當長期鈣攝入不足，機體勢必動用大量的骨鈣來維持體液鈣的水平，影響骨骼健康。在兒童身上會引起佝僂病，成人則會發生嚴重骨質疏松。科學研究表明，人體需鈣量在不同時期存在差異，膳食營養中的攝入的鈣質并不全能被人體吸收利用，被腸道吸收后通過血循環沉積到骨骼中，部分經腸道、腎臟等途徑排出體外。在這一系列過程中，不僅與多種營養元素相互作用，還受到多種激素的調控。因此，遺傳因素的影響是一個重要方面，不同基因型、不同遺傳體質的人群鈣吸收代謝能力存在差異，特別是兒童、青少年人群，處于生長發育旺盛時期，對鈣的需求量高，鈣的足量攝入尤為重要，一旦鈣在體內的吸收代謝過程發生障礙，不但影響到兒童的正常生長發育，還可導致兒童時期的佝僂病，低鈣性手足搐搦，孕婦骨礦含量下降、牙齒損害和骨質疏松等問題。

從遺傳角度評估人群個體對鈣元素的需求程度，通過基因檢測來評估個體對鈣需求的情況，以及時進行干預，指導合理補充。但對于鈣需求相關基因的檢測，現有采用的Sanger測序、Taqman法、高分辨率溶解曲線等檢測，往往存在通量低，操作步驟繁瑣，并且為了更加全面合理地指導鈣質補充，隨著檢測位點的增多時，對于大通量地檢測多基因位點反而容易出現特異性和靈敏度低，上樣量高，檢出率和檢測效率降低、準確度低的問題，因而始終無法將其有效應用于評估個體對于鈣需求的差異，以指導補充鈣質的遺傳檢測中。

發明內容

鑒以此，本發明提出一種用于檢測鈣需求相關基因SNP位點的試劑盒及應用，該試劑盒不僅能夠快速同步檢測多個SNP位點,對與鈣需求相關的基因SNP位點進行有效的基因分型，而且有效提高了更多數量的SNP位點在一個反應體系中分型的準確性且檢測限低，反應電泳圖譜結果穩定清晰，實現快速而準確地給出鈣質補充的指導意見。

本發明的技術方案是這樣實現的：

一種用于檢測鈣需求相關基因SNP位點的試劑盒，包括用于檢測鈣需求相關的GC基因RS2282679位點、IL-6基因RS1800795位點、PTH基因RS6254位點、VDR基因RS1544410位點和VDR基因RS2228570位點的引物組合物，所述引物組合物的序列為：

GC基因RS2282679位點的正反向PCR引物：SEQ ID No:1-2，正向延伸引物：SEQ IDNo:11；

IL-6基因RS1800795位點正反向PCR引物：SEQ ID No:3-4，正向延伸引物：SEQ IDNo:12；

PTH基因RS6254位點正反向PCR引物：SEQ ID No:5-6，正向延伸引物：SEQ ID No:13；

VDR基因RS1544410位點正反向PCR引物：SEQ ID No:7-8，正向延伸引物：SEQ IDNo:14；