[發明專利]一種酶結合物稀釋液、一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒及其使用方法

在審

• 申請號: 202010205998.4
• 申請日: 2020-03-20
• 公開（公告）號: CN113495157A
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發明（設計）人: 王玲玲;普鵬
• 申請（專利權）人: 鄭州達諾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/78
• 分類號: G01N33/78;G01N33/577
• 代理公司: 鄭州中原專利事務所有限公司 41109
• 代理人: 霍彥偉;王喚霞

本發明提供一種酶結合物稀釋液、一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒及其使用方法，本申請提供的酶結合物稀釋液可以增強酶結合物的穩定性，同時抑制解離劑對酶結合物的破壞作用，實現兩者可以共存于同一試劑組分中，在總甲狀腺素檢測中可以同時滿足總甲狀腺素解離、降低新舊樣本干擾和HAMA干擾，從而使本申請提供的總甲狀腺素定量檢測試劑盒達到更快速更便捷的操作和獲取更準確的檢測結果。

技術領域

本發明涉及免疫學檢測技術領域，尤其是涉及一種酶結合物稀釋液、一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒及其使用方法。

背景技術

T4(L—甲狀腺素)是一種在甲狀腺中合成并儲存分泌的激素。蛋白酶水解濾泡甲狀腺球蛋白，將T4釋放入血。人血中99.97％的T4可逆結合于三種血漿蛋白—甲狀腺結合球蛋白(TBG)結合約70％的T4，其余大約30％T4結合于甲狀腺結合前白蛋白(TBPA)和白蛋白上，任何時候都約有0.03％的T4在血液中處于游離未結合狀態。

針對總甲狀腺素(TT4)現有的檢測方法有液相色譜-串聯質譜法、免疫學方法。其中免疫學方法因其檢測快捷，成本低廉是目前臨床應用的主流方法。平臺上又形成了化學發光、酶聯免疫、免疫熒光、免疫比濁、熒光免疫等產品形式。

應用免疫學方法的產品中，目前應用較多的方法是：固相化抗甲狀腺素(T4)抗體，酶標記甲狀腺素(T4)抗原，對樣本進行前處理使總甲狀腺素(TT4)從結合蛋白上解離為游離態。然后酶標記的甲狀腺素(T4)抗原和樣本處理后呈現游離態的甲狀腺素(T4)抗原，競爭結合固相化的抗甲狀腺素(T4)抗體，進行競爭法檢測。例如：北京科美東雅公司、北京源德生物、北京美康生物、鄭州安圖生物等公司使用的都是這種方法，這種方法需要單獨進行一步樣本前處理，重要的是該方法容易造成一定比例的結合蛋白異常的樣品檢測結果錯誤。原因是這些樣本的結合蛋白解離后有機會與酶標記的甲狀腺素(T4)抗原形成新的結合，從而造成干擾競爭反應的后果。或者只能使用兩步法操作，避免結合蛋白與酶標記抗原發生結合。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供一種酶結合物稀釋液、一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒及其使用方法，本申請提供的酶結合物稀釋液可以增強酶結合物的穩定性，同時抑制解離劑對酶結合物的破壞作用，實現兩者可以共存于同一試劑組分中，在總甲狀腺素檢測中可以同時滿足總甲狀腺素解離、降低新舊樣本干擾和HAMA干擾，從而使本申請提供的總甲狀腺素定量檢測試劑盒達到更快速更便捷的操作和獲取更準確的檢測結果。

本發明的目的是以下述方式實現的：一種酶結合物稀釋液，包括BSA、胰蛋白胨、氨基比林。

具體的，一種酶結合物稀釋液，包括巴比妥鈉緩沖液、ANS、BSA、胰蛋白胨、氨基比林、IPBC、HBR、Proclin300。

巴比妥鈉緩沖液為PH值為6.8-8的巴比妥鈉緩沖液。

一種酶結合物稀釋液，每升中含有BSA 25-35g、胰蛋白胨7-12g、氨基比林0.8-1.2g。

一種酶結合物稀釋液，每升中含有巴比妥鈉緩沖液978ml、ANS 3g、BSA 30g、胰蛋白胨10g、氨基比林1g、IPBC 1g、HBR 50mg、Proclin300 1ml，巴比妥鈉緩沖液為每10.3g巴比妥鈉配制成1L的巴比妥鈉水溶液，然后加入6M的鹽酸配制成PH值為7.4的巴比妥鈉緩沖液。

一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒，包括包被有甲狀腺素的包被板、酶標記抗甲狀腺素單抗的酶結合物、和甲狀腺素校準品，其中酶結合物為通過在酶結合物稀釋液中加入酶標記甲狀腺素單克隆抗體制備而成。

酶結合物稀釋液與酶標記甲狀腺素單克隆抗體的體積比為4500-5500：1。

酶結合物稀釋液與酶標記甲狀腺素單克隆抗體的體積比為5000：1。