[發明專利]一種酶結合物稀釋液、一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒及其使用方法

在審

• 申請號: 202010205998.4
• 申請日: 2020-03-20
• 公開（公告）號: CN113495157A
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發明（設計）人: 王玲玲;普鵬
• 申請（專利權）人: 鄭州達諾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/78
• 分類號: G01N33/78;G01N33/577
• 代理公司: 鄭州中原專利事務所有限公司 41109
• 代理人: 霍彥偉;王喚霞

1.一種酶結合物稀釋液，其特征在于：包括BSA、胰蛋白胨、氨基比林。

2.根據權利要求1所述的酶結合物稀釋液，其特征在于：包括巴比妥鈉緩沖液、ANS、BSA、胰蛋白胨、氨基比林、IPBC、HBR、Proclin300。

3.根據權利要求1或2所述的酶結合物稀釋液，其特征在于：巴比妥鈉緩沖液為PH值為6.8-8的巴比妥鈉緩沖液。

4.根據權利要求1或2所述的酶結合物稀釋液，其特征在于：每升中含有BSA 25-35g、胰蛋白胨7-12g、氨基比林0.8-1.2g。

5.根據權利要求1或2所述的酶結合物稀釋液，其特征在于：每升中含有巴比妥鈉緩沖液978ml、ANS 3g、BSA 30g、胰蛋白胨 10g、氨基比林1g、IPBC 1g、HBR 50mg、Proclin3001ml，巴比妥鈉緩沖液為每10.3g巴比妥鈉配制成1L的巴比妥鈉水溶液，然后加入6M的鹽酸配制成PH值為7.4的巴比妥鈉緩沖液。

6.一種總甲狀腺素定量檢測試劑盒，其特征在于：包括包被有甲狀腺素的包被板、酶標記抗甲狀腺素單抗的酶結合物、和甲狀腺素校準品，其中酶結合物為通過在酶結合物稀釋液中加入酶標記甲狀腺素單克隆抗體制備而成。

7.根據權利要求1所述的總甲狀腺素定量檢測試劑盒，其特征在于：酶結合物稀釋液與酶標記甲狀腺素單克隆抗體的體積比為4500-5500：1。

8.根據權利要求6所述的總甲狀腺素定量檢測試劑盒，其特征在于：包被有甲狀腺素的包被板的制備方法，包括以下步驟：（1）將T4-BSA加入到tris-HCl緩沖液中配制成包被液，充分混勻；

（2）將配制好的包被液加入空白酶標板內，在2～8℃下放置16-24hr；

（3）甩去酶標板中的包被液，酶標板表面無液體后，用洗液洗板至少2次；

（4）洗板后2分鐘內封閉，然后每個孔內加入封閉液，然后在2～8℃下放置16～24hr；

（5）將酶標板的封閉液甩出，然后將酶標板放置在烘干裝置中干燥4-8hr，濕度≤30%。

9.根據權利要求6所述的總甲狀腺素定量檢測試劑盒，其特征在于：甲狀腺素校準品的的制備方法，包括以下步驟：（1）使用PH為6.8-7.5的HEPES緩沖液、BSA、制霉菌素、Proclin300配制校準品稀釋液；

（2）使用校準品稀釋液對甲狀腺素進行稀釋，分別配制成不同濃度的甲狀腺素校準品。

10.根據權利要求6-9任一權利要求所述的總甲狀腺素定量檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：包括以下步驟，（1）加樣：取出一定量的包被板上編號的包被孔，用微量移液器依次加入50μl校準品及待測樣本，再加入酶結合物50μl；

（2）、溫育：將加樣后的包被板置37℃環境溫度下60分鐘；

（3）、洗滌：甩去包被孔內液體，用稀釋后的洗滌液注滿各包被孔，靜置20秒，甩掉，如此反復洗滌5次，每次均需甩凈液體，最后在吸水紙上拍干；

（4）、顯色：每包被孔加底物液100μl，室溫（18~23℃）避光反應20分鐘；

（5）、終止：每包被孔加終止液50μl，終止反應。