[發明專利]用于檢測呼吸道感染病毒的核酸試劑、試劑盒、系統及方法

在審

• 申請號: 202010197605.X
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111349720A
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發明（設計）人: 任麗麗;林笑冬;王曉艷;郭麗;楊海英;肖艷;岳素文;馮志迪;傅成波;王雷;王健偉;張志強
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院病原生物學研究所;北京卓誠惠生生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93
• 代理公司: 北京英創嘉友知識產權代理事務所(普通合伙) 11447
• 代理人: 耿超

本公開涉及一種用于檢測呼吸道感染病毒的核酸試劑，其中，所述核酸試劑包括分別彼此獨立存放或互相任意混合存放的SEQ ID NO.1?8所示的引物和SEQ ID NO.11?14所示的探針。本公開通過以上所述引物和探針建立了檢測新型冠狀病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒的核酸試劑、試劑盒、系統及方法，同時加入內參基因作為對照，實現快速、全面、靈敏、特異、自動的檢測結果判定，顯著提高了對上述檢測目標同時進行檢測的靈敏性、特異性和簡便性。

技術領域

本公開涉及生物技術領域，具體地，涉及一種用于檢測呼吸道感染病毒 的核酸試劑、試劑盒、系統及方法。

背景技術

呼吸道感染(Respiratorytractinfection，RTI)是一種常見疾病，廣泛發 生于任何年齡、性別及地域的人群中，對個人、家庭和社會造成了嚴重的疾 病負擔。病毒感染是引發呼吸道感染的重要因素，在發達國家，急性病毒性 呼吸道感染是導致嬰幼兒和兒童住院的首要因素；在發展中國家，急性病毒 性呼吸道感染是導致嬰幼兒和兒童死亡的首要因素。

新型冠狀病毒是2019年末首次發現的一種呼吸道感染病毒，被命名為 2019-nCoV，能夠引發嚴重的肺炎癥狀，嚴重時可以導致患者死亡。因此， 早日對新型冠狀病毒感染和普通呼吸道病毒感染進行診斷，早日對新型冠狀 病毒感染的患者進行隔離和治療，對于遏制疫情發展、緩解社會壓力極為重 要。

病毒的分離培養是呼吸道感染病毒檢驗的常用方法，其檢驗結果常被作 為呼吸道病毒感染確診的“金標準”，常用的培養細胞由人肺癌細胞(A59)、 馬丁達比犬腎細胞(MDCK)等，根據培養樣本的不同，不同病毒培養的時 間也有所不同，一般需要花費數日到兩周不等，培養時間較長，不利于呼吸 道病毒感染的快速檢測，容易導致延誤治療，而且該方法的特異性和敏感性 均較差，不適用于感染程度較輕時的早期診斷。

發明內容

本公開的目的是提供一種特異性和靈敏度高的、快速、準確檢測呼吸道 感染病毒的核酸試劑、試劑盒及系統。

為了實現上述目的，本公開提供一種用于檢測呼吸道感染病毒的核酸試 劑，其中，所述核酸試劑包括分別彼此獨立存放或互相任意混合存放的 SEQIDNO.1-8所示的引物和SEQIDNO.11-14所示的探針。

可選地，所述核酸試劑中，分別由SEQIDNO.1-8所示的引物的含量各 自為0.4-0.6μmol，分別由SEQIDNO.11-14所示的探針的含量各自為 0.1-0.3μmol。

可選地，所述核酸試劑還包括內標對照；

所述內標對照含有SEQIDNO.9-10所示的引物和SEQIDNO.15所示的探 針，其中，分別由SEQIDNO.9-10所示的引物的含量各自為0.2-0.4μmol，由 SEQIDNO.15所示的探針的含量為0.1-0.3μmol。

可選地，所述核酸試劑包括A管和B管；A管含有SEQIDNO.1-4、9-10 所示的引物和SEQIDNO.11-12、15所示的探針；B管含有SEQIDNO.5-8、 9-10所示的引物和SEQIDNO.13-14、15所示的探針。

可選地，SEQIDNO.11和13所示的探針具有第一熒光標記；SEQIDNO.12 和14所示的探針具有第二熒光標記；SEQIDNO.15所示的探針具有第三熒 光標記；所述第一熒光標記、所述第二熒光標記和所述第三熒光標記各不相 同，且各自獨立地選自FAM熒光標記、JOE熒光標記、CY5熒光標記、VIC 熒光標記和ROX熒光標記中的一種。

可選地，所述呼吸道感染病毒包括新型冠狀病毒、甲型流感病毒和乙型 流感病毒中的至少一種。

本公開還提供一種用于檢測呼吸道感染病毒的試劑盒，該試劑盒含有上 述任意一項所述的核酸試劑，并且可選地，所述試劑盒還含有反應體系緩沖 液、逆轉錄酶、DNA聚合酶、陽性對照和水中的至少一種。