[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010196129.X
• 申請(qǐng)日: 2020-03-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111366727B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王娟;趙超;魏勝男
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/569
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/569;G01N33/543;G01N21/78
• 代理公司: 長(zhǎng)春眾邦菁華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 22214
• 代理人: 李外

1.一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，包括：

步驟一：Fe₃O₄納米粒子的制備

將FeCl₃·6H₂O、檸檬酸鈉和CH₃COONa·3H₂O在乙二醇中室溫磁攪拌至完全溶解，然后將所得均質(zhì)溶液轉(zhuǎn)移至反應(yīng)釜內(nèi),將反應(yīng)釜放置于烘箱中反應(yīng)，用永磁鐵從反應(yīng)溶液中分離黑褐色的固體物質(zhì)，清洗后得到具有超順磁性的Fe₃O₄納米粒子；

步驟二：Fe₃O₄@Ag磁性納米粒子的制備

將AgNO₃和聚乙烯吡咯烷酮k-30溶于聚乙二醇中，充分溶解后，加入步驟一制備的Fe₃O₄納米粒子分散其中進(jìn)行反應(yīng)，用永磁鐵從反應(yīng)溶液中分離褐色的固體物質(zhì)，清洗后得到Fe₃O₄@Ag磁性納米粒子；

步驟三：沙門(mén)氏菌的apt-Fe₃O₄@Ag NPs納米探針的制備

將三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽溶液加入到鼠傷寒沙門(mén)氏菌適配體水溶液，室溫條件下混旋，得到活化后的適配體溶液，將步驟二得到的Fe₃O₄@Ag納米粒子加入上述活化后的適配體溶液，室溫條件下混旋過(guò)夜，得到沙門(mén)氏菌的apt-Fe₃O₄@Ag NPs納米探針；

步驟四：尿素/苯酚紅試紙的制備

將苯酚紅和尿素溶于乙醇溶液中，將濾紙浸泡在上述溶液中，浸泡過(guò)后的試紙進(jìn)行干燥，得到尿素/苯酚紅試紙；

步驟五：刻蝕劑的制備

取H₂O₂加至PBS緩沖液中，混合均勻，得到H₂O₂刻蝕劑，避光保存?zhèn)溆茫?/p>

步驟六：脲酶溶液的制備

稱(chēng)取脲酶溶于PBS緩沖液中，得到脲酶溶液，保存?zhèn)溆谩?/p>

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述的步驟一中FeCl₃·6H₂O、檸檬酸鈉和CH₃COONa·3H₂O質(zhì)量比為2.16：0.5：3.34。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述步驟一的反應(yīng)溫度為200℃，反應(yīng)時(shí)間為10h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述步驟二的AgNO₃、聚乙烯吡咯烷酮k-30、Fe₃O₄納米粒子的質(zhì)量比為0.1：2.5：0.2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述的步驟二的反應(yīng)溫度為100℃，反應(yīng)時(shí)間為12h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述步驟三中三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽溶液的濃度為1mM，鼠傷寒沙門(mén)氏菌適配體水溶液的濃度為10μM。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述步驟三中三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽溶液和鼠傷寒沙門(mén)氏菌適配體水溶液的體積比為1：10。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述步驟三的鼠傷寒沙門(mén)氏菌適配體水溶液的體積μL：Fe₃O₄@Ag納米粒子的質(zhì)量mg為10：1。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述步驟四中苯酚紅和尿素的質(zhì)量比為0.1：3。