[發明專利]一種基于膠體金法快速檢測結核菌分泌蛋白的方法

在審

• 申請號: 202010194087.6
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111443198A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 何麗美;崔俊杰;楊皓恩
• 申請（專利權）人: 濟南杏恩生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 濟南尚本知識產權代理事務所(普通合伙) 37307
• 代理人: 楊寶根

一種基于膠體金法快速檢測結核菌分泌蛋白的方法，本方法通過膠體金法判斷人體體液中是否含有活動性結核分枝桿菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所轉譯出的分泌蛋白，從而判斷是否患有結核病。本發明提供一種利用膠體金法判斷人體體液中是否含有活動性結核分枝桿菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所轉譯出的分泌蛋白，其通過試紙條進行檢測，其操作簡單，一步法即可完成，且檢測時間短只需要15min即可得出結果，無需專業技術，即使不在實驗室環境下也能完成操作，且成本低，其敏感度和特異性雖然略低于結核菌培養法和GeneXperts的熒光DNA分子生物學方法，但是高于痰抗酸染色法，且其成本低，操作簡單，測試時間快，故而適合廣泛用于初步的結核病檢測。

技術領域

本發明屬于結核病檢測領域，具體地說是一種基于膠體金法快速檢測結核菌分泌蛋白的方法。

背景技術

結核病是嚴重危害群眾健康的經由空氣飛沫傳染的呼吸道疾病，及病的防治工作負擔重，對社會影響很大，是全球每個國家重大公共衛生和社會問題。根據WHO的估算2018年全球新結核患者約1000萬人，結核病發病率為10萬人有133人。而我國新發的結核病人約90萬人，是全球第三高負擔國家。我國結核病死亡率穩步下降，但約八成以上的肺結核病人在農村或是流動人口，為結核病防治目標帶來巨大挑戰。WHO以「終止全球結核病流行」作為2016至2035年重要的目標，其中對肺核病高危險人群進行系統篩檢為主要的策略，包括:(1)確保活動性結核病的早期檢測和適當的治療；(2)降低治療不良的風險及結核病治療的后遺癥、社會對立與經濟耗損；(3)降低結核病傳播，最終目標是減少未來發病率。因此，對于肺結核病如何提供一個快速的，簡易的，有效性的，安全性，經濟性的篩查檢測方法，是屬可以遍及到縣區級定點醫療機構或者居家中做檢測監控及追蹤的第一線的初步篩査檢測的工具。

結核病的檢測自1882年就已經開始使用痰抗酸染色法通過顯鏡觀察分枝桿菌，但是這種方法操作復雜，出報告時間需要兩天，還需要特殊的專業技術，且對于實驗室要求較高，需要至少二級P2實驗室，且敏感度和特異性較低；1980年結核菌培養法誕生，其也需要特殊的專業技術，且對于實驗室要求較高，需要至少二級P2實驗室，但是其敏感度和特異性遠高于痰抗酸染色法，但是其出報告時間太長需要7-56天，且成本高昂遠高于痰抗酸染色法的成本，無形中增加了被檢測的經濟負擔；2010年GeneXperts以熒光DNA分子生物學方法來檢測活動性結核分枝桿菌的在2小時內以快速方法來檢測并鑒定，且不需要特殊專業技術，實驗室要求低，普通實驗室即可滿足要求，且其敏感度和特異性高于結核菌培養法，但是成本十分高昂較之結核菌培養法，大大增加了被測者的經濟負擔。故而目前需要一種操作簡單，檢測迅速且成本較低的結核病檢測方法。

本公司在研究中發現目前雖然有用結核菌的分泌蛋白作為檢測目標物，但是目前還沒有人將結核菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所轉譯出的分泌蛋白運用到結核病的檢測中。