[發明專利]一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法

在審

• 申請號: 202010188283.2
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111171112A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 馮誠誠;蘇健;黃如葵;琚茜茜;黃玉輝;陳小鳳;黃熊娟;梁家作;秦健;劉杏連
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 北京眾達德權知識產權代理有限公司 11570
• 代理人: 劉杰

一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，包括如下步驟：(1)先將苦瓜種子干燥后，再將未剝殼的苦瓜籽粉碎成細粉，過篩，備用；(2)在稱取苦瓜籽細粉中加入水，室溫下超聲波處理，水浴中保溫；(3)邊加邊攪拌，用稀鹽酸調pH值；(4)在料液中加入果膠酶、纖維酶，緩慢的攪拌均勻，置于水浴中靜置；(5)邊加邊攪拌，調pH；(6)加入脂肪酶，緩慢的攪拌均勻，水浴中靜置；(7)邊加邊攪拌，將溶液的pH值調至9.5，靜置；(8)將混合液離心，取上清液，過濾；(9)邊加邊攪拌，濾液用鹽酸溶液調整pH值，靜置；(10)將混合液離心，棄去上清液，取沉淀；(11)將沉淀至半透膜上，洗去鹽和雜質；(12)將除雜后的蛋白凍干，即得到苦瓜籽的總蛋白。

技術領域

本發明屬于天然活性物質提取技術領域，具體涉及一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法。

背景技術

苦瓜(Momordica charantia L.)為葫蘆科苦瓜屬一年生攀緣草本植物，苦瓜作為藥食同源的植物，具較高的營養價值和食療功效。近年來，苦瓜種植面積逐漸增加，已成為“南菜北運”的主要蔬菜品種和特色產業。苦瓜籽蛋白是一種天然高分子化合物，富含核糖體失活蛋白，苦瓜素等多種活性成分，具降血糖、抗癌、抗病毒、增強免疫力等保健功能。苦瓜籽是苦瓜精深加工的副產物，是一種應用潛力較大的優質植物蛋白資源。近年來我國對苦瓜籽蛋白方面的研究相對較少，主要集中在其蛋白分子的分離純化和生物活性等方面，對苦瓜籽蛋白提取工藝的研究鮮見報道。本工藝采用蛋白質等電點沉淀法分離總蛋白質，所得的總蛋白利率為16.68％。與鹽析法相比，降低了所需的物料成本，后續工藝節省大量的透析時間；較重金屬和丙酮沉-三氯乙酸淀法，能獲得非變性的蛋白，有利于保留苦瓜籽蛋白的活性功能。本工藝采用半透膜超濾的方法去除雜質，能縮短時間，有利于保留蛋白的活性。同時，通過凍干法干燥蛋白，最大程度的避免加熱對蛋白的破壞，獲得疏松易溶解的蛋白粉末。通過酶法提取具有作用條件溫和，很少產生毒害物質的優點，利于后續保健食品和藥品的開發。

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

發明內容

為解決以上問題，本發明提供了一種產品活性高、制備工藝簡單、易于工業化生產的苦瓜籽蛋白的制備方法。

為實現上述目的，本發明提供的技術方案如下：

一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，包括如下步驟：

(1)先將苦瓜種子干燥后，再將未剝殼的苦瓜籽粉碎成細粉，過40目篩，備用；

(2)稱取苦瓜籽細粉加入10倍量的水，室溫下超聲波提取裝置提取20min后，水浴中保溫6h；

(3)邊加邊攪拌，用稀鹽酸(1M)調整pH值到5.5；

(4)在料液中加入果膠酶0.2g，纖維酶1.0g，緩慢的攪拌均勻，置于53℃水浴中靜置6h；

(5)邊加邊攪拌，用氫氧化鈉溶液(1M)調整pH值到8.5；

(6)加入脂肪酶1.0g，緩慢的攪拌均勻，45℃水浴中靜置12h；

(7)邊加邊攪拌，將溶液的pH值用氫氧化鈉溶液(1M)調至9.5，靜置3h；

(8)將pH9.5的混合液離心10min，取上清液，濾紙過濾；

(9)邊加邊攪拌，濾液用1M的鹽酸調整pH值至3.0，靜置6h以上；

(10)將pH3.0的混合液離心10min，棄去上清液，取沉淀；

(11)將沉淀至半透膜上，用10倍量的純水洗去鹽和其它雜質；

(12)將除雜后的蛋白用凍干法凍干，得到淺黃色的粉末，即為苦瓜籽的總蛋白。