[發(fā)明專利]一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010188283.2
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111171112A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發(fā)明（設計）人: 馮誠誠;蘇健;黃如葵;琚茜茜;黃玉輝;陳小鳳;黃熊娟;梁家作;秦健;劉杏連
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區(qū)農業(yè)科學院
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 北京眾達德權知識產權代理有限公司 11570
• 代理人: 劉杰

1.一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)先將苦瓜種子干燥后，再將未剝殼的苦瓜籽粉碎成細粉，過40目篩，備用；

(2)稱取苦瓜籽細粉加入10倍量的水，室溫下超聲波提取裝置提取20min后，水浴中保溫6h；

(3)邊加邊攪拌，用稀鹽酸(1M)調整pH值到5.5；

(4)在料液中加入果膠酶0.2g，纖維酶1.0g，緩慢的攪拌均勻，置于53℃水浴中靜置6h；

(5)邊加邊攪拌，用氫氧化鈉溶液(1M)調整pH值到8.5；

(6)加入脂肪酶1.0g，緩慢的攪拌均勻，45℃水浴中靜置12h；

(7)邊加邊攪拌，將溶液的pH值用氫氧化鈉溶液(1M)調至9.5，靜置3h；

(8)將pH9.5的混合液離心10min，取上清液，濾紙過濾；

(9)邊加邊攪拌，濾液用1M的鹽酸調整pH值至3.0，靜置6h以上；

(10)將pH3.0的混合液離心10min，棄去上清液，取沉淀；

(11)將沉淀至半透膜上，用10倍量的純水洗去鹽和其它雜質；

(12)將除雜后的蛋白用凍干法凍干，得到淺黃色的粉末，即為苦瓜籽的總蛋白。

2.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(1)中的苦瓜為授粉22天后的苦瓜。

3.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(2)中水浴的溫度為60℃。

4.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(2)中超聲波提取裝置的功率為380W，頻率為100kHz。

5.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(4)中果膠酶的酶活力為7萬U/mL，纖維酶的酶活力為1.1萬U/mL。

6.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(4)中果膠酶的濃度為0.01％，纖維酶的濃度為0.05％。

7.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(6)中脂肪酶的酶活力為10萬U/mL。

8.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(6)中脂肪酶的濃度為0.05％。

9.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(8)和步驟(10)中離心的轉速為10000r/min。

10.根據(jù)權利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法，其特征在于，步驟(11)中半透膜的截留分子量為30k。