[發(fā)明專利]一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010188283.2 | 申請(qǐng)日: | 2020-03-17 |
| 公開(公告)號(hào): | CN111171112A | 公開(公告)日: | 2020-05-19 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 馮誠誠;蘇健;黃如葵;琚茜茜;黃玉輝;陳小鳳;黃熊娟;梁家作;秦健;劉杏連 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號(hào): | C07K1/36 | 分類號(hào): | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30 |
| 代理公司: | 北京眾達(dá)德權(quán)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11570 | 代理人: | 劉杰 |
| 地址: | 530007 廣西壯族*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 瓜籽 蛋白 提取 方法 | ||
1.一種苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)先將苦瓜種子干燥后,再將未剝殼的苦瓜籽粉碎成細(xì)粉,過40目篩,備用;
(2)稱取苦瓜籽細(xì)粉加入10倍量的水,室溫下超聲波提取裝置提取20min后,水浴中保溫6h;
(3)邊加邊攪拌,用稀鹽酸(1M)調(diào)整pH值到5.5;
(4)在料液中加入果膠酶0.2g,纖維酶1.0g,緩慢的攪拌均勻,置于53℃水浴中靜置6h;
(5)邊加邊攪拌,用氫氧化鈉溶液(1M)調(diào)整pH值到8.5;
(6)加入脂肪酶1.0g,緩慢的攪拌均勻,45℃水浴中靜置12h;
(7)邊加邊攪拌,將溶液的pH值用氫氧化鈉溶液(1M)調(diào)至9.5,靜置3h;
(8)將pH9.5的混合液離心10min,取上清液,濾紙過濾;
(9)邊加邊攪拌,濾液用1M的鹽酸調(diào)整pH值至3.0,靜置6h以上;
(10)將pH3.0的混合液離心10min,棄去上清液,取沉淀;
(11)將沉淀至半透膜上,用10倍量的純水洗去鹽和其它雜質(zhì);
(12)將除雜后的蛋白用凍干法凍干,得到淺黃色的粉末,即為苦瓜籽的總蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(1)中的苦瓜為授粉22天后的苦瓜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(2)中水浴的溫度為60℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(2)中超聲波提取裝置的功率為380W,頻率為100kHz。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(4)中果膠酶的酶活力為7萬U/mL,纖維酶的酶活力為1.1萬U/mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(4)中果膠酶的濃度為0.01%,纖維酶的濃度為0.05%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(6)中脂肪酶的酶活力為10萬U/mL。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(6)中脂肪酶的濃度為0.05%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(8)和步驟(10)中離心的轉(zhuǎn)速為10000r/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜籽蛋白的酶解提取方法,其特征在于,步驟(11)中半透膜的截留分子量為30k。
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