[發(fā)明專(zhuān)利]一種利用酶法輔助超聲制備靈芝孢子粉壁殼粗多糖的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010188136.5
• 申請(qǐng)日: 2020-03-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111269954B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 帥玉英;俞汾;王帥帥
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P19/14
• 分類(lèi)號(hào): C12P19/14;C12P19/04;C08B37/00
• 代理公司: 杭州賽科專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 33230
• 代理人: 馮年群

本發(fā)明公開(kāi)了一種利用酶法輔助超聲制備靈芝孢子粉壁殼粗多糖的方法，其技術(shù)方案要點(diǎn)包括如下步驟：將粉碎后的靈芝孢子粉壁殼經(jīng)篩分設(shè)備，得到粉徑大于100目的靈芝孢子壁殼粉；將靈芝孢子壁殼粉先經(jīng)過(guò)復(fù)合酶處理，再進(jìn)行超聲處理，然后經(jīng)滅活后進(jìn)行過(guò)濾，取上清液，得到靈芝孢子粉壁殼粗多糖的提取液；在提取液中加入無(wú)水乙醇進(jìn)行醇沉，得到沉淀分離液，取沉淀分離液的底層沉淀物進(jìn)行濃縮和干燥，最后得到靈芝孢子粉壁殼粗多糖。本發(fā)明提取出的靈芝粗多糖得率高達(dá)11.25%，相比于直接提取粗多糖效率提高近百倍，同時(shí)粗多糖具有保濕效果和多種免疫功能，可廣泛應(yīng)用于保健品和美容市場(chǎng)等。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及真菌有效物質(zhì)提取的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用酶法輔助超聲制備靈芝孢子粉壁殼粗多糖的方法。

技術(shù)背景

靈芝孢子是靈芝(Ganodermalucidum)在生長(zhǎng)成熟期，從靈芝菌褶中彈射出來(lái)的極其微小的卵形生殖細(xì)胞即靈芝的種子。每個(gè)靈芝孢子只有4-6個(gè)微米，是活體生物體，雙壁結(jié)構(gòu)，外被堅(jiān)硬的幾丁質(zhì)纖維素所包圍，具有靈芝的全部遺傳活性物質(zhì)。其孢子粉、子實(shí)體均可入藥。靈芝的化學(xué)成分非常復(fù)雜，含有靈芝多糖、三萜類(lèi)化合物、蛋白質(zhì)、氨基酸、甾醇、生物堿等活性成分?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，靈芝多糖具有抗腫瘤、抗炎癥、保護(hù)肝臟、降低膽固醇、降血糖、抗輻射、增強(qiáng)免疫力和抗病毒作用。靈芝多糖還具有良好的保濕作用,其保濕效果優(yōu)于本領(lǐng)域常用的透明質(zhì)酸。

現(xiàn)有研究表明，靈芝孢子粉中的有效物質(zhì)不經(jīng)過(guò)破壁難以被人體消化吸收，所以目前靈芝孢子粉的提取工藝流程大致為：靈芝孢子粉破壁-水加熱提取-脫脂處理,剩余的細(xì)胞壁為靈芝孢子壁殼，目前對(duì)于靈芝孢子粉壁殼是作為廢料來(lái)處理，造成了極大的資源浪費(fèi)。

發(fā)明內(nèi)容

為了避免靈芝孢子粉在提取有效成分后剩余靈芝孢子粉壁殼的處理問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于采用復(fù)合酶法處理靈芝孢子粉壁殼，并通過(guò)超聲來(lái)輔助復(fù)合酶進(jìn)行協(xié)同處理，從而得到一種高效提取靈芝壁殼中粗多糖的方法，不僅有效的提高靈芝粗多糖得率，而且具有高效、降低成本和節(jié)能環(huán)保的效果。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：一種利用酶法輔助超聲制備靈芝孢子粉壁殼粗多糖的方法，包括如下步驟：

S1、取得靈芝孢子粉在經(jīng)過(guò)破壁、熱水提取和脫脂處理后剩余的靈芝孢子粉壁殼，將靈芝孢子粉壁殼粉碎后經(jīng)篩分設(shè)備，得到粒徑大于100目的靈芝孢子壁殼粉；

S2、將步驟S1中的靈芝孢子壁殼粉與復(fù)合酶進(jìn)行混合，得到混合物所述復(fù)合酶由幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和半纖維素酶組成；在混合物中加入pH為4.5?6.5的緩沖液后先置于45?65℃的恒溫培養(yǎng)設(shè)備內(nèi)進(jìn)行酶解，再進(jìn)行超聲處理，得到酶解液；

S3、將步驟S2中的酶解液滅活后進(jìn)行過(guò)濾，得到過(guò)濾分離液，取過(guò)濾分離液的上清液，得到靈芝孢子粉壁殼粗多糖的提取液；

S4、在步驟S3中的提取液中加入無(wú)水乙醇進(jìn)行醇沉，得到沉淀分離液，取沉淀分離液的底層沉淀物進(jìn)行濃縮和干燥，最后得到靈芝孢子粉壁殼粗多糖。

通過(guò)上述技術(shù)方案，本發(fā)明是首次針對(duì)靈芝孢子粉提取后的靈芝孢子粉壁殼廢料進(jìn)行處理，將靈芝孢子粉壁殼粉碎進(jìn)行篩選，得到粒徑大于100目的靈芝孢子壁殼粉。將靈芝孢子粉壁殼粉碎成粉末加大了原料與溶劑接觸的表面積，方便靈芝粗多糖的溶解。經(jīng)復(fù)合酶處理提取粗多糖后，再經(jīng)超聲處理，利用超聲波的空化作用、機(jī)械效應(yīng)和熱效應(yīng)等加速粗多糖的釋放、擴(kuò)散和溶解，進(jìn)一步提高粗多糖提取效率。

作為優(yōu)選的，所述步驟S2中復(fù)合酶由幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和半纖維素酶按質(zhì)量比為1:0:0?8:1:1的比例進(jìn)行混合得到。

通過(guò)上述技術(shù)方案，復(fù)合酶作為生物催化劑，可以有效加速反應(yīng)速度，使靈芝孢子粉壁殼粗多糖的提取過(guò)程更高效且有效降低成本。

作為優(yōu)選的，所述步驟S2中靈芝孢子壁殼粉與復(fù)合酶的質(zhì)量比為25：1?10:1。