[發明專利]一種高耐鎘菌株及其分離篩選方法

在審

• 申請號: 202010185252.1
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111925950A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 李文;王陶;陳銀元
• 申請（專利權）人: 徐州工程學院
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/02;C12R1/645
• 代理公司: 合肥律眾知識產權代理有限公司 34147
• 代理人: 鄧盛花

1.一種高耐鎘菌株，其特征在于：所述菌株于2018年05月28日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC)，菌種保藏號為GDMCC No：60378，其26S rDNA序列是序列表SEQ NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的一種高耐鎘菌株，其特征在于：所述菌株在固體培養基中最大耐受鎘的濃度為22000mg/L，液體培養基中最大耐受鎘的濃度為18000mg/L。

3.根據權利要求1或2所述的一種高耐鎘菌株的分離篩選方法，其特征在于：包括以下具體步驟：

(1)菌株的分離純化，選取多種重金屬污染土壤樣品制成土壤懸液，取上清液均勻涂布到含100mg/L氯化鎘的固體純化培養基，分別挑取單個菌落，采用平板劃線分離法將菌落分別種到鎘濃度為100、150、200mg/L的固體培養基中將耐鎘能力最強的菌落選出，對其單菌落連續4次采用平板劃線分離法進行純化；

(2)高耐鎘菌株的篩選，將純化所得菌株依次接種到含鎘濃度分別為250-24000mg/L的系列濃度梯度的同種篩選培養基上，室溫下進行培養，挑選出抗高濃度鎘的菌株，得到本發明的高耐鎘菌株，其編號為QN-3。

4.根據權利要求3所述的一種高耐鎘菌株的分離篩選方法，其特征在于：所述土壤懸液的具體制備步驟為：將土壤樣品與無菌水按照1:10的重量比進行混合，在室溫條件下150r/min振蕩30min后靜置10min。

5.根據權利要求3所述的一種高耐鎘菌株的分離篩選方法，其特征在于：所述固體純化培養基包括以下組分：葡萄糖15g，酵母提取物5g，選礦黑藥2g，選礦黃藥4g，七水硫酸鎂3mL，硫酸銨2mL，氯化鉀4mL，硫酸錳0.3g，瓊脂20g，溴酚藍6mL。

6.根據權利要求3所述的一種高耐鎘菌株的分離篩選方法，其特征在于：所述篩選培養基為PDA固體培養基或PDA液體培養基，具體包括以下組分：蔗糖20g，瓊脂20g，馬鈴薯200g，純水1000mL，氯化鎘濃度梯度100mg/L，200mg/L，250mg/L，300mg/L，400mg/L，500mg/L，600mg/L，700mg/L，800mg/L，900mg/L，1000mg/L，1600mg/L，1800mg/L，2000mg/L，2200mg/L，2400mg/L，2500mg/L，2600mg/L，4000mg/L，6000mg/L，8000mg/L，10000mg/L，11000mg/L，12000mg/L，13000mg/L，14000mg/L，15000mg/L，16000mg/L，17000mg/L，18000mg/L，19000mg/L，20000mg/L，22000mg/L，24000mg/L。