[發(fā)明專利]一種快速定量檢測全血中sST2的微流控?zé)晒饷庖咝酒?/span>在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010184111.8 | 申請日： | 2020-03-17 |
| 公開（公告）號： | CN111308098A | 公開（公告）日： | 2020-06-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王鵬;郭聞軒 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京利德曼生化股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/577;G01N21/64 |
| 代理公司： | 天津翰林知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 12210 | 代理人： | 付長杰 |
| 地址： | 100176 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 快速 定量 檢測 全血中 sst2 微流控 熒光 免疫 芯片 | ||
1.一種快速定量檢測全血中sST2的微流控?zé)晒饷庖咝酒ㄖ行陌搴偷装澹鲋行陌搴退龅装鍑@此凹部彼此相疊的區(qū)域通過激光焊接來直接地并且以流體密封方式彼此結(jié)合，樣本流道與所述測量格呈流體接觸并且在所述樣本流道上設(shè)有用于溶解示蹤試劑的示蹤區(qū)、兩個樣本混合區(qū)域、液體檢測監(jiān)控區(qū)域、樣本流道端部有樣本廢料區(qū)域，在測量格對應(yīng)位置的中心板上設(shè)置捕獲區(qū)；其特征在于，
所述芯片示蹤區(qū)預(yù)先封裝示蹤試劑，所述示蹤試劑包括用熒光激發(fā)波長為610-660nm的熒光染料標(biāo)記的sST2單克隆抗體和用熒光激發(fā)波長為610-660nm的熒光染料標(biāo)記的質(zhì)控物；
所述捕獲試劑包括sST2單克隆抗體和質(zhì)控物單克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微流控?zé)晒饷庖咝酒涮卣髟谟冢霾东@試劑通過使用高精度點樣儀，以每滴300-600pL的液滴噴在芯片的捕獲區(qū)內(nèi)上，噴點形成3個以上等間距的6*7矩形點陣，噴點不相互重合；捕獲區(qū)sST2單克隆抗體的濃度為0.5～2.0mg/mL，所述捕獲區(qū)質(zhì)控物單克隆抗體的濃度為0.5～2.0mg/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微流控?zé)晒饷庖咝酒涮卣髟谟冢东@劑每滴體積為350pL，矩形點陣數(shù)量為3個；捕獲區(qū)sST2單克隆抗體的濃度為0.5mg/mL；所述捕獲區(qū)質(zhì)控物單克隆抗體的濃度為0.75mg/mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的微流控?zé)晒饷庖咝酒涮卣髟谟冢鍪聚櫾噭┩ㄟ^使用高精度點樣儀，均勻的將示蹤試劑噴涂在芯片的示蹤區(qū)，形成兩條平行的直線，每滴示蹤劑體積為4-6μL；所述熒光染料為Cy5花菁染料；示蹤區(qū)Cy5花菁染料標(biāo)記的sST2單克隆抗體濃度為0.3～1.0μg/mL，所述示蹤區(qū)質(zhì)控物濃度為0.05～0.50μg/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微流控?zé)晒饷庖咝酒涮卣髟谟冢聚檯^(qū)Cy5花菁染料標(biāo)記的sST2單克隆抗體濃度為0.5μg/mL，所述示蹤區(qū)質(zhì)控物濃度為0.2μg/mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微流控?zé)晒饷庖咝酒涮卣髟谟冢鍪聚櫾噭┻€包括動物蛋白、表面活性劑、異噬性抗體阻斷劑、防腐劑和緩沖液；所述動物蛋白選自牛血清白蛋白、酪蛋白其中的一種，所述動物蛋白的質(zhì)量百分比濃度為5.0～10.0％，所述的表面活性劑選自BRIJ 35、Triton X-100，Tween 20中的一種，所述表面活性劑的質(zhì)量百分比濃度為0.01～0.05％；所述異嗜性抗體阻斷劑濃度為10-100μg/mL；所述防腐劑選自疊氮化鈉和Procline300中的一種，所述防腐劑的質(zhì)量百分比濃度為0.05～0.2％；所述緩沖液選自PBS緩沖液、HEPES緩沖液、Tris-HCl緩沖液、MES緩沖液和MOPS緩沖液中的一種，所述緩沖液pH值為6.0～9.0；
所述捕獲試劑還包括防腐劑和緩沖液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的微流控?zé)晒饷庖咝酒涮卣髟谟冢瑒游锏鞍诪橘|(zhì)量百分比濃度為5.0％的牛血清白蛋白；表面活性劑為質(zhì)量百分比濃度為0.01％的Tween 20；異嗜性抗體阻斷劑濃度為50μg/mL，防腐劑為質(zhì)量百分比濃度為0.1％的疊氮化鈉，緩沖液為pH為7.2的HEPES緩沖液。
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