[發(fā)明專利]兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物、其提取方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010184069.X
• 申請(qǐng)日: 2020-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN111285766B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張彩云;張小坡;孫萬瑩;張勇;邱軍強(qiáng);李祎瑩;陳麗珍;張璐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): C07C67/48
• 分類號(hào): C07C67/48;C07C67/56;C07C67/58;C07C69/78;A61P3/10
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 張新蕊

本發(fā)明屬于生物化學(xué)醫(yī)藥領(lǐng)域，公開了兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物、其提取方法及其應(yīng)用。本發(fā)明的兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物其結(jié)構(gòu)如下所示：該化合物從冰糖草中提取、分離得到，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)上述化合物可顯著抗胰島細(xì)胞凋亡。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物化學(xué)醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言涉及兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物、其提取方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

糖尿病是當(dāng)前嚴(yán)重威脅全人類健康的慢性疾病之一，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),在糖尿病患者中，90％以上為2型糖尿病(T2DM)。T2DM早期以胰島素抵抗為主，隨著病程延長，胰島β細(xì)胞功能逐漸減退，病情逐漸加重。細(xì)胞凋亡是胰島β細(xì)胞功能衰退的最終形式，進(jìn)而導(dǎo)致胰島素分泌不足引起血糖升高。盡管市售藥物可以降低患者血糖，但細(xì)胞凋亡仍是糖尿病逐漸加重的主要元兇。除控制好血糖以外，使用可減少β細(xì)胞凋亡的藥物是現(xiàn)代T2DM治療的新核心，臨床上使用的抗糖尿病藥物尚無直接針對(duì)胰島細(xì)β胞凋亡起效的藥物。因此，尋找安全有效的抗胰島β細(xì)胞凋亡藥物可有效解決T2DM的治療問題。

冰糖草(Scoparia dulcis L.)系玄參科(Scrophulariaceae)野甘草屬(Scoparia)植物，其枝葉嚼之有甜味而得名“冰糖草”。冰糖草在我國主產(chǎn)于海南、廣東等地區(qū)，具有清熱解毒的功效，在海南黎族地區(qū)作為黎藥使用。課題組調(diào)研發(fā)現(xiàn)，冰糖草在海南全島均有分布，資源豐富，被當(dāng)?shù)乩栳t(yī)用于糖尿病的防治。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明第一個(gè)方面是提供兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物，其結(jié)構(gòu)如式I所示：

本發(fā)明第二個(gè)方面是提供上述兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物的提取方法，包括以下步驟：

(1)冰糖草全株，干燥；使用有機(jī)溶劑加熱回流提取，過濾得到冰糖草總提取液，減壓濃縮至無醇味，得總提取液；取所得總提取液，加入水溶解后，加入石油醚萃取，去掉上層有機(jī)相，水層用二氯甲烷萃取后，回收下層有機(jī)相，減壓濃縮，得二氯甲烷萃取總浸膏；

(2)取所得總浸膏，進(jìn)行硅膠柱層析，使用不同比例的石油醚-二氯甲烷為洗脫劑，進(jìn)行梯度洗脫，收集石油醚-二氯甲烷＝85：15比例洗脫下來的洗脫液進(jìn)行濃縮，對(duì)所得流分采用高效液相色譜進(jìn)行純化，得到化合物1和2。

進(jìn)一步，所述步驟(1)中所用的提取劑為甲醇和/或乙醇。

進(jìn)一步，所述的步驟(2)中，硅膠柱層析所用硅膠粒徑為200-300目。

進(jìn)一步，所述步驟(2)中，濃縮采用減壓濃縮，干燥采用真空冷凍干燥。

進(jìn)一步，所述步驟(2)所述石油醚-二氯甲烷體積比為依次為100:0、98:2、95:5、90:10、85:15，所用硅膠粒徑為200-300目。

進(jìn)一步，所述步驟(3)中所述高效液相色譜柱為ZORAX SB-phenyl，洗脫劑為甲醇-水(55：45)，流速為2mL/min，洗脫時(shí)間為40min，化合物1和2的保留時(shí)間約分別為26.3、35.3分鐘。

本發(fā)明第二個(gè)方面是提供以上所述的兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物在制備抗胰島細(xì)胞凋亡藥物上應(yīng)用。

進(jìn)一步，所述的胰島素細(xì)胞為MIN6細(xì)胞。

進(jìn)一步，所述兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物的濃度均為25-50μM。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明的所述的兩個(gè)賴百當(dāng)二萜類化合物，從冰糖草中分離得到。通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，其具有顯著的抗胰島細(xì)胞凋亡的功效，為解決T2DM的治療問題提供新的選擇。

附圖說明