[發明專利]一種脂肪源性干細胞的培養方法在審
| 申請號： | 202010183696.1 | 申請日： | 2020-03-16 |
| 公開（公告）號： | CN113403269A | 公開（公告）日： | 2021-09-17 |
| 發明（設計）人： | 高山峨 | 申請（專利權）人： | 上海泉眼生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 上海宏京知識產權代理事務所(普通合伙) 31297 | 代理人： | 鄧文武 |
| 地址： | 201210 上海市浦東新區中國*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 脂肪 干細胞 培養 方法 | ||
1.一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟一、將脂肪塊與消化液按照體積比為2：(0.8～1.2)混合，在30～40℃下震蕩消化10～90min，靜置，吸取上層脂肪細胞液加入培養基中，密封后離心去除上清液，再加入培養基吹打細胞，即得脂肪源性干細胞懸液待用；
步驟二、滴加培養基使得培養瓶的頂部潤濕，將脂肪源性干細胞懸液接種至已潤濕的培養瓶的頂部，晃動培養瓶使得脂肪源性干細胞懸液與培養瓶的頂部接觸，將培養瓶翻轉180°，使得脂肪源性干細胞懸液鋪到培養瓶的底面，在35～40℃下進行恒溫培養，即可。
2.根據權利要求1所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟一中脂肪塊與消化液的體積比為2：1。
3.根據權利要求2所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟一中消化液含有濃度為0.1～5mg/ml的I型膠原酶。
4.根據權利要求1所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟一中震蕩消化的溫度為35～39℃，時間為20～60min。
5.根據權利要求4所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟一中震蕩消化的溫度為37℃，時間為20～60min。
6.根據權利要求1～5任一項所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟一中脂肪塊的制作過程為：將脂肪組織采用D-Hanks緩沖液清洗后剪碎，即得脂肪塊。
7.根據權利要求1所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述培養基中含有復合生長因子。
8.根據權利要求1所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟二中培養瓶的材質為親油疏水材料。
9.根據權利要求1或8所述的一種脂肪源性干細胞的培養方法，其特征在于：所述步驟二中恒溫培養的溫度為37℃。
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