[發(fā)明專利]響應(yīng)面法提取獨(dú)一味中黃酮類化合物的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010182876.8
• 申請(qǐng)日: 2020-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN111494455A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔勐;孫麗影;杜楊;趙鳳嬌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所
• 主分類號(hào): A61K36/53
• 分類號(hào): A61K36/53;G06F30/20;G06F111/04;G06F17/18
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 王洋

本發(fā)明提供了一種響應(yīng)面法提取獨(dú)一味中黃酮類化合物的方法，包括：A)將獨(dú)一味粉碎，過篩，得到藥材粉末；B)將藥材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超聲提取10～30min，過濾，得到黃酮類化合物提取液；所述浸泡時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)以及固液比的超聲提取條件采用響應(yīng)面法優(yōu)化。本發(fā)明通過單因素和響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn)優(yōu)化超聲法提取獨(dú)一味中黃酮的提取工藝，從而得到最佳的提取條件。是解決傳統(tǒng)方法提取獨(dú)一味中總黃酮提取率低的問題,為獨(dú)一味中黃酮的大規(guī)模生產(chǎn)以及植物中黃酮類化合物的開發(fā)提供了理論依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物的提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及響應(yīng)面法提取獨(dú)一味中黃酮類化合物的方法。

背景技術(shù)

獨(dú)一味(Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo)是來自青藏高原的一種特有的植物。它廣泛分布在西藏、青海、甘肅和四川等地。它的地上部分表現(xiàn)出廣泛的藥理活性，例如：治療跌打損傷、外傷出血、黃水病、風(fēng)濕痹痛、活血化瘀以及祛風(fēng)止痛等。獨(dú)一味中主要存在兩大類成分：環(huán)烯醚萜苷類和黃酮類。人們對(duì)于環(huán)烯醚萜苷的研究較多，而對(duì)黃酮的關(guān)注較少。但是黃酮的藥理活性很重要，例如：抗氧化、抗抑郁、抗糖尿病、抗炎、抗腫瘤和神經(jīng)保護(hù)等作用。因此，獨(dú)一味中黃酮的提取至關(guān)重要。

黃酮類化合物的常規(guī)提取方法包括浸漬法、回流提取法以及索氏提取法等，主要存在以下問題：消耗大量有機(jī)溶劑、費(fèi)時(shí)且提取率低。與之相比，超聲提取是近年來發(fā)展起來的，它不僅可以保留組分的結(jié)構(gòu)及其分子特性，還可以減少溶劑和能源消耗，節(jié)省時(shí)間并簡(jiǎn)化操作。

傳統(tǒng)的優(yōu)化方法正交實(shí)驗(yàn)提取獨(dú)一味中的總黃酮，提取率較低，無法清晰找到響應(yīng)值與自變量之間的函數(shù)表達(dá)式。開發(fā)一種方法，解決傳統(tǒng)方法提取獨(dú)一味中總黃酮提取率低的問題是必要的。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種響應(yīng)面法提取獨(dú)一味中黃酮類化合物的方法，本發(fā)明提供的方法提取率高，純度高。

本發(fā)明提供了一種響應(yīng)面法提取獨(dú)一味中總黃酮的方法，包括：

A)將獨(dú)一味粉碎，過篩，得到藥材粉末；

B)將藥材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超聲提取10～30min，過濾，得到黃酮類化合物提取液；

所述浸泡時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)以及固液比的超聲提取條件采用響應(yīng)面法優(yōu)化，具體為：

i)單因素考察：采用超聲提取技術(shù)進(jìn)行獨(dú)一味中總黃酮的提取，按照浸泡時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)、固液比、提取時(shí)間以及超聲功率分別設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)；

ii)所述在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用統(tǒng)計(jì)軟件Design Expert 11，以獨(dú)一味中黃酮類化合物提取率為響應(yīng)值，選擇對(duì)黃酮提取率影響較大的浸泡時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)以及固液比為響應(yīng)因素，應(yīng)用中心復(fù)合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，設(shè)計(jì)三因素五水平的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)；

iii)將藥材粉末進(jìn)行超聲提取，得到藥材在浸泡時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)以及固液比條件下的藥材中總黃酮的提取率；應(yīng)用Design Expert 11，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸擬合分析，得到獨(dú)一味中總黃酮的最佳超聲提取條件。

優(yōu)選的，步驟A)所述過篩具體為過40目篩。

優(yōu)選的，步驟B)所述提取的次數(shù)為1～3次。

優(yōu)選的，所述步驟iii)包括：利用紫外-可見光譜儀測(cè)定待測(cè)樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液中的黃酮類化合物含量。

優(yōu)選的，所述步驟iii)包括：應(yīng)用Design Expert 11，建立實(shí)驗(yàn)因素對(duì)響應(yīng)值影響的二次多項(xiàng)式方程模型，并對(duì)響應(yīng)面多元回歸模型進(jìn)行方差分析和顯著性檢驗(yàn)。