[發(fā)明專利]一種茖蔥體細胞再生植株的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010181906.3
• 申請日: 2020-03-16
• 公開（公告）號: CN111264390A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設計）人: 唐曉杰;程廣有
• 申請（專利權）人: 北華大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 屠佳婕

本發(fā)明涉及一種茖蔥體細胞再生植株的方法，包括以下步驟：S1外植體：鱗莖，S2培養(yǎng)基：MS基本培養(yǎng)基，添加不同種類和用量生長調節(jié)劑，配制成茖蔥初級、繼代和生根培養(yǎng)基；培養(yǎng)基pH值5.5?6.0，蔗糖20g·L?1，常規(guī)方法滅菌；S3接種與培養(yǎng)：(1)接種、(2)初級培養(yǎng)、(3)繼代培養(yǎng)、(4)不定根誘導、(5)試管苗移栽，本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比的優(yōu)點在于：解決了茖蔥常規(guī)方法繁殖率低的問題,提高組培茖蔥成苗率，解決茖蔥工廠化育苗關鍵技術。

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，具體是指一種茖蔥體細胞再生植株的方法。

背景技術

茖蔥(Allium victorialis L.)為百合科蔥屬多年生草本植物，其性微溫、味辛、無毒、歸肺經，具辛散溫通，芳香辟穢、用于風寒感冒、嘔惡脹滿之癥，生于陰濕山坡、林下、草地溝邊，嫩葉可供食用。

茖蔥鱗莖長橢圓形，鱗莖皮成絲網狀，葉2-3枚，長8-20厘米，寬3-9.5厘米，基部楔形，沿葉柄稍下延，先端漸尖或短尖，葉具長柄，長卵形或長橢圓形，全緣，質軟而平滑，稍帶粉白色；平行脈，花葶圓柱狀，高25-80厘米，1/4-1/2被葉鞘，總苞2裂，宿存，傘形花序球狀，具多而密集的花，小花梗近等長，簇生于莖頂，成傘形花序排列；花莖長30～60厘米，花小，綠白色乃至淡紫色，花被6，雄蕊6，子房上位，3室，花柱絲狀，柱頭小。蒴果，室背開裂，種子黑色，花果期6-8月。鱗莖單生或2～3枚聚生，近圓柱狀，鱗莖外皮灰褐色至黑褐色，破裂成纖維狀，呈明顯的網狀。

茖蔥的繁殖較困難。同大多數(shù)蔥屬植物相同，其繁殖方式可分為有性繁殖和無性繁殖，有性繁殖主要是種子繁殖法，但3～4年生以上的茖蔥才能開花結實，并且，種子壽命短，深度休眠，播種育苗成苗率低，分株法繁殖率低。

發(fā)明內容

本發(fā)明要解決的技術問題是克服以上技術缺陷，提供一種有效解決茖蔥常規(guī)方法繁殖率低的問題，提高組培茖蔥成苗率高的一種茖蔥體細胞再生植株的方法。

本發(fā)明提供的技術方案為：一種茖蔥體細胞再生植株的方法，包括以下步驟：

S1外植體：鱗莖。取茖蔥鱗莖，洗凈，切成1cm方塊，備用；

S2培養(yǎng)基：MS基本培養(yǎng)基，添加不同種類和用量生長調節(jié)劑，配制成茖蔥初級、繼代和生根培養(yǎng)基；

初級培養(yǎng)：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.2mg/L；

繼代培養(yǎng)：MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.2mg/L；

不定根誘導：1/2MS+IBA0.5mg/L；

培養(yǎng)基pH值5.5-6.0，蔗糖20g·L-1，常規(guī)方法滅菌；

S3接種與培養(yǎng)：

(1)接種：用自來水沖洗鱗莖，再用洗潔精加自來水溶液搓洗鱗莖表面之后，用自來水沖去洗潔精溶液，把清洗好的寒蔥鱗莖在無菌室內放入滅菌好的燒杯里，倒入0.1％氯化汞表面消毒液浸泡8min，最后用無菌水沖洗鱗莖表面5遍，把沖洗好的寒蔥鱗莖在無菌狀態(tài)下接種在MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L培養(yǎng)基上，接種后放在培養(yǎng)室內培養(yǎng)，溫度23～25℃，光照強度3300～3500lux，光照時間12h；

(2)初級培養(yǎng)：將鱗莖萌發(fā)出的葉片切割下來接種在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.2mg/L+2,4-D 0.2mg/L培養(yǎng)上；

(3)繼代培養(yǎng)：培養(yǎng)基MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.2mg/L上，繼代周期40天；