[發(fā)明專利]同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010181763.6
• 申請(qǐng)日: 2020-03-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111187744A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙晶;張瑞振
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廈門大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 廈門南強(qiáng)之路專利事務(wù)所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應(yīng)森

1.高密度工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于其原料按質(zhì)量百分比的組成為：酵母粉0.4％～0.7％、豆粕粉2％～5％、葡萄糖1％～4％、玉米淀粉1％～4％、玉米蛋白粉0.3％～0.6％、NaCl 0.3％～0.6％、MgSO₄0.3％～0.6％、Na₂HPO₄ 0.3％～0.6％、(NH₄)₂SO₄ 0.4％～0.8％、K₂HPO₄0.04％～0.1％、MnSO₄ 0.04％～0.07％、NH₄Cl 0.1％～0.3％，pH值8.0～9.0。

2.同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于包括以下步驟：

1)將保存于-80℃的同溫層芽孢桿菌Bacillus stratosphericus A3440接種于2216E瓊脂培養(yǎng)基上，經(jīng)25～30℃恒溫培養(yǎng)36～48h活化；

2)將活化好的同溫層芽孢桿菌單菌落接種于裝有已經(jīng)消毒滅菌的種子培養(yǎng)基的容器中，再將容器置于恒溫?fù)u床培養(yǎng)，得到一級(jí)種子液；

3)將一級(jí)種子液接種至裝有已經(jīng)消毒滅菌的如權(quán)利要求1所述高密度工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基的種子罐中，設(shè)置各發(fā)酵參數(shù)進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵36～48h后結(jié)束發(fā)酵，得到二級(jí)種子液；

4)將二級(jí)種子液接種至裝有已經(jīng)消毒滅菌的如權(quán)利要求1所述高密度工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，設(shè)置各發(fā)酵參數(shù)進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵36～48h后結(jié)束發(fā)酵。

3.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟1)中，所述活化是活化2次。

4.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟2)中，所述接種的接種量為3％～6％。

5.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟2)中，所述種子培養(yǎng)基原料配方按質(zhì)量百分比為：蛋白胨0.7％、酵母粉0.7％、NaCl 0.5％、MgSO₄0.4％、Na₂HPO₄ 0.5％、(NH₄)₂SO₄ 0.4％。

6.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟2)中，所述恒溫?fù)u床培養(yǎng)的條件為：恒溫?fù)u床180～200rpm，25～30℃培養(yǎng)36～48h。

7.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟3)中，所述一級(jí)種子液的裝液量為罐體積的60％～70％。

8.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟4)中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的滅菌條件為115～121℃下消毒滅菌30min。

9.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟4)中，所述發(fā)酵罐采用100～1000L發(fā)酵罐；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的裝液量為罐體積的60％～70％。

10.如權(quán)利要求2所述同溫層芽孢桿菌高密度工業(yè)發(fā)酵方法，其特征在于在步驟4)中，所述發(fā)酵參數(shù)為：通氣量0.8～1.2(V/V·min)、罐壓0.1～0.2MP、攪拌轉(zhuǎn)速180～400rpm，發(fā)酵的溫度25～30℃，發(fā)酵的時(shí)間為36～48h。