[發明專利]一種檢測SARS-CoV-2 IgM-IgG抗體總量的量子點微球免疫層析試紙條

在審

• 申請號: 202010177152.4
• 申請日: 2020-03-13
• 公開（公告）號: CN111426829A
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發明（設計）人: 劉斐;王彬;單衍可;李寶杰;李嘉豪
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;李曉峰

本發明公開一種檢測新型冠狀病毒IgM?IgG抗體總量的量子點微球免疫層析試紙條，該試紙條包括底板、樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次首尾銜接粘貼在底板上，結合墊上包被有N蛋白?標記物和S蛋白?標記物，硝酸纖維膜上設有包被N蛋白和S蛋白混合物的檢測線和包被N蛋白抗體和S蛋白抗體混合物的質控線。利用該試紙條定量檢測新型冠狀病毒抗體總量，檢測靈敏度高，準確性好，具有良好的重復性和穩定性；操作簡單，成本低廉，可快速定量檢測人體內SARS?CoV?2 IgM?IgG抗體總量水平，為疫情提供有力支持。

技術領域

本發明屬于醫學診斷制品的生產和技術領域，具體涉及一種檢測SARS-CoV-2IgM- IgG抗體總量的量子點微球免疫層析試紙條。

背景技術

2019年出現了由一種尚未發現的冠狀病毒感染引起的急性呼吸道傳染病。這種病毒被世界衛生組織(WHO)命名為嚴重急性呼吸系統綜合征冠狀病毒2型(SARS-CoV-2)，這種病毒引起的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)已經造成了全國80303人感染，2947例死亡(截止至2020.03.04)。

新型冠狀病毒屬于β屬的新型冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，常為多形性，直徑為60-140nm，通過對新型冠狀病毒與2003年非典，即嚴重急性呼吸綜合征(SARS)的冠狀病毒(SARS-CoV)、中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)進行全基因組比對發現新病毒與后兩者平均分別達到70％和40％的序列相似性。其中不同冠狀病毒與宿主細胞作用的關鍵spike基因(編碼S-蛋白)，有更大的差異性，并且其核蛋白(N protein)產生抗體水平高且在體內持續時間較長。

由于沒有有效的治療藥物或疫苗，最好的措施是控制傳染源，早期診斷，及時隔離患者，目前有許多科研團隊研究早期診斷方法，但其主要方法為逆轉錄聚合酶鏈反應(Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)。RT-PCR需要對疑似患者采樣 (通常為咽拭子上呼吸道采樣)采樣，但是咽拭子標本核酸檢出率偏低，靈敏度不高，容易造成假陰性結果且RT-PCR的操作需要專業的實驗人員，昂貴的設備和安全的實驗環境。面對全國突發的疫情，利用RT-PCR核酸檢測顯然無法滿足大規模的及時，準確的早期診斷。不能滿足現場檢測的要求，故急需開發操作簡便、可即時、高準確度的快速檢測產品。

本發明設計的量子點微球免疫層析試紙條，是以量子點微球作為標記物建立的一種免疫層析方法。本發明利用一對新冠狀病毒的N蛋白和S蛋白來檢測疑似患者體內抗體含量。量子點激發光譜寬而發射波長窄，熒光效率高，生物兼容性好，量子點微球是一種通過高聚物載體上吸附或包埋量子點而形成的一種標記物，單體量子點微球包裹有數百或者數千的量子點顆粒，因此相較于量子點，具有更高的發光強度，可有效提高檢測靈敏度和穩定性。結合熒光檢測儀，可實現快速定量檢測，具有良好的臨床應用前景和意義。

發明內容

本發明的目的在于克服目前缺少快速檢測是否患有新型冠狀病毒肺炎的產品問題，本發明設計的SARS-CoV-2的IgM-IgG抗體總量檢測試紙條應用簡便，結果準確，為下一步準確治療由SARS-CoV-2引起的疾病提供了依據，適于大規模推廣應用。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種檢測新型冠狀病毒IgM-IgG抗體總量的量子點微球免疫層析試紙條，該試紙條包括底板、樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述的樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次首尾銜接粘貼在底板上，所述的結合墊上包被有新型冠狀病毒N蛋白-標記物和 S蛋白-標記物，所述的硝酸纖維膜上依次設有包被新型冠狀病毒N蛋白和S蛋白混合物的檢測線和包被新型冠狀病毒N蛋白抗體和S蛋白抗體混合物的質控線。

優選的：所述底板的材料為PVC或硬質不吸水的材料；

優選的：所述樣品墊的材料為玻璃纖維、棉纖維、濾紙纖維或聚脂纖維；