[發明專利]一種脂溶性維生素有關物質檢測方法

有效

• 申請號: 202010176676.1
• 申請日: 2020-03-13
• 公開（公告）號: CN111307978B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發明（設計）人: 陳林;李明楊;胡芝蘭;金永娟
• 申請（專利權）人: 安徽東盛友邦制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/32;G01N30/30;G01N30/74
• 代理公司: 北京久維律師事務所 11582
• 代理人: 邢江峰

維生素是人和動物為維持正常的生理功能而必須從食物中獲得的一類微量有機物質，在人體生長、代謝、發育過程中發揮著重要的作用。脂溶性維生素(fat?solublevitamins)是不溶于水而溶于脂肪及非極性有機溶劑(如苯、乙醚及氯仿等)的一類維生素，包括維生素A、維生素D、維生素E、維生素K等。維生素在體內的含量很少，但不可或缺，對維生素D3進行有效的質量控制存在一定的難度且顯得格外重要。其質量測定方法是用高效液相色譜一測多評的方法測定，10ug規格制劑中維生素D3含量不得低于90％，單個雜質含量不得大于0.5％。本發明的優點是方法簡單，可以一次性測定制劑中維生素的含量及有關物質，同時也是首個在維生素類制劑中提出雜質控制的制劑品種。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，涉及一種或多種維生素制劑的質量檢測方法，具體是一種補鈣劑碳酸鈣D3片的質量檢測方法。

技術背景

維生素是人和動物為維持正常的生理功能而必須從食物中獲得的一類微量有機物質，維生素在體內的含量很少，但不可或缺，在人體生長、代謝、發育過程中發揮著重要的作用。其中脂溶性維生素(fat-solublevitamins)是不溶于水而溶于脂肪及非極性有機溶劑（如苯、乙醚及氯仿等）的一類維生素，包括維生素A、維生素D、維生素E、維生素K等。

中國居民膳食指南（ 2016），美國衛生公共服務部、美國農業部，2015—2020美國居民膳食指南，第8版，推薦攝取含有維生素D食物，并適當補充維生素D，推薦維生素D攝入量每天不低于600UI；中華預防醫學會推薦嬰兒從出生開始，應當在醫生指導下每天補充維生素D 400-800國際單位，中國營養學會推薦50歲以上人群每天攝入維生素D 10μg（但不要超過20μg）。

維生素D3是維生素D中生物代謝率最高的一種活性形式。每天需要補充約10ug維生素D3，維生素D3具有5個手性中心和一個順反共軛結構，理論上具有63個異構體，實際維生素D3結構具有不穩定性，對光、熱、紫外線都不穩定，所以控制維生素D3質量，顯得格外重要。在成品制劑中每制劑單位含有維生素D3 10ug，又增加了質控難度。

國內生產維生素D3相關制劑企業眾多，但國內外都沒有制劑的雜質控制技術參考，無法保證臨床應用效果，且會增加雜質帶來的副作用。

英國藥典2018版和中國藥典2015版中收入了維生素D3原料的有關物質檢測方法，采用正相色譜系統，硅膠色譜柱，以正己烷：正戊醇=997：3為流動相，進行洗脫。該方法可有效分離維生素D3，但維生素D3萃取繁瑣，正己烷揮發快，對操作人員造成傷害，在色譜分析時，對高效液相色譜儀脫氣系統、比例閥、密封墊加快老化，增加設備維護成本，不利于推廣。文獻“高效液相色譜法測定保健食品中維生素 D3的含量，食品安全質量檢測學報，2017年5月，第8卷第5期”同樣采用正相色譜系統檢測含量。文獻“RP—HPLC 法測定維 生素 D3制劑 中的有關物質，中國藥科大學學報，2012，43（1）：55-59”采用正己烷萃取碳酸鈣D3片中維生素D3，氮氣吹干，甲醇復溶制備供試品溶液，采用美國Sepax公司C18色譜柱，流動相乙腈，柱溫20℃，檢測波長265nm，流速1.0ml/min，進樣體積20uL對供試品進行洗脫。供試品溶液萃取、濃縮操作繁瑣，以純乙腈為流動相，等度洗脫，方法可行性有待考察。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的在于通過維生素D3有關物質進行定性定量分析，提供一種脂溶性維生素質控方法，所述脂溶性維生素是指維生素D、維生素A、生育酚及添加其他原料、輔料組成的維生素復方制劑，其中脂溶性維生素含量為5ppm~1000ppm；包括以下步驟：

（1） 色譜條件：用反相色譜條件檢測，以十八烷基硅烷鍵合硅膠柱對復方制劑中維生素進行雜質分析，單個雜質不得大于1%；

（2）洗脫方法：以乙腈和水作為流動相，采用梯度洗脫方法，流速0.9~1.5mL/min，乙腈在50分鐘內由40%增加到100%。