[發明專利]一種單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法在審
| 申請號： | 202010174352.4 | 申請日： | 2020-03-13 |
| 公開（公告）號： | CN111139271A | 公開（公告）日： | 2020-05-12 |
| 發明（設計）人： | 薛亞平;程峰;周仕芃;鄭裕國;金利群;徐建妙 | 申請（專利權）人： | 浙江工業大學 |
| 主分類號： | C12P13/04 | 分類號： | C12P13/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡紅娟 |
| 地址： | 310014 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 單一 轉氨酶 催化 級聯 反應 不對稱 合成 草銨膦 方法 | ||
1.一種單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，包括：以4-(甲基羥基磷酰基)-2-羰基-丁酸或其鹽為底物，在氨基供體存在的反應體系中，利用離體的轉氨酶或體外表達轉氨酶的細胞催化底物，發生轉氨反應，得到L-草銨膦；
其特征在于，所述氨基供體由兩種氨基酸組成，分別為L-谷氨酸和L-天冬氨酸；反應體系中僅添加一種轉氨酶，且該轉氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.如權利要求1所述的單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，其特征在于，所述細胞為表達轉氨酶的工程菌，所述工程菌的宿主細胞為E.coli BL21(DE3)。
3.如權利要求2所述的單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，其特征在于，反應體系中，以濕菌體重量計，所述工程菌的添加量為20～200g/L反應液。
4.如權利要求1所述的單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，其特征在于，所述反應體系中的緩沖液為Tris/HCl緩沖液，pH為8～9。
5.如權利要求1所述的單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，其特征在于，所述L-谷氨酸和L-天冬氨酸的摩爾比為1:4～1:8。
6.如權利要求5所述的單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，其特征在于，所述氨基供體與底物的摩爾比為1.2～1.6:1。
7.如權利要求1所述的單一轉氨酶催化級聯反應不對稱合成L-草銨膦的方法，其特征在于，所述轉氨反應的溫度為35～45℃，時間為24～48h。
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