[發明專利]一種糖修飾的葉酸衍生物制備的納米運載顆粒及其應用

有效

• 申請號: 202010173608.X
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111714640B
• 公開（公告）日: 2023-02-14
• 發明（設計）人: 金紹明;葛紹陽;劉治麟;王鵬杰;杜仲堯
• 申請（專利權）人: 北京和益源生物技術有限公司
• 主分類號: A61K47/54
• 分類號: A61K47/54;A61K47/69;A61K45/00;A61K33/243;A61K31/7068;A61K31/513;A61K31/704;A61K31/337;A61P35/00;A61P15/00;A61P15/14;C07H15/04;C07H1/00
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本發明公開了一種糖修飾的葉酸衍生物制備的納米運載顆粒及其應用，所述納米運載顆粒是將葉酸和糖通過碳鏈做為連接橋，利用化學鍵的方式結合在一起，形成的一種新型納米運載顆粒。所述糖包含但不限于以下種類的五碳糖和六碳糖，脫氧葡萄糖，葡萄糖，氨基葡萄糖，果糖，乳糖等；所述糖與葉酸之間通過糖苷鍵或酯鍵連接，且糖與葉酸之間修飾的碳鏈長度可以為2至18個碳原子之間的任意數量。本發明所述的納米運載顆粒，可以用于裝載抗腫瘤藥物，且所述抗腫瘤藥物的分子量在20～2000道爾頓。所述納米運載顆粒，不僅解決了葉酸水溶性差的問題，穩定性高，還具有自組裝的性質，形成穩定的納米顆粒，并且能靶向高效運載多種抗腫瘤藥物。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別涉及到一種糖修飾的葉酸衍生物制備的納米運載顆粒及其應用。

背景技術

葉酸受體是人體內某些腫瘤細胞表面高表達的受體，以葉酸受體為靶點進行的抗腫瘤治療藥物開發已持續多年，但至今仍未有成熟的治療藥物推向市場。現有的葉酸相關的抗腫瘤藥物開發，大多是以葉酸修飾大分子PEG(聚乙二醇)，以此做為載體，或者做為多種材料混合載體的一部分，運載抗腫瘤藥物。這種治療策略雖然可以實現靶向葉酸受體的功能，但存在著多種不足。首先，這些載體中葉酸修飾的多是聚合物大分子，造成在分子中葉酸的含量比例較低，靶向效率低下；其次，這些大分子聚合物形成的納米顆粒粒徑不均一，運載抗腫瘤藥物的效率不高；再次，這些大分子聚合物聚集之后形成的顆粒容易刺激免疫系統，造成免疫原性反應，影響治療的效果。

綜上，改善葉酸相關的抗腫瘤藥物治療思路，開發新的靶向效率高，粒徑均一，運載效果好，且不易引起免疫原性反應的新的靶向葉酸受體的納米顆運載粒，是葉酸相關的抗腫瘤治療藥物研發新方向。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的是提供一種糖修飾的葉酸衍生物制備的納米運載顆粒，及其作為靶向抗腫瘤藥物納米運載顆粒的應用。在研究兩親性小分子納米藥物的基礎上，應用與葉酸親水性差異較大的糖類小分子，修飾葉酸，制備內部親水性差異較大的分子，在溶液中能自組裝成納米顆粒，通過與抗腫瘤藥物以配位鍵、氫鍵等非共價化學鍵的方式，將抗腫瘤藥物包裹在納米顆粒內部，靶向輸送至腫瘤部位之后釋放，發揮較好的抗腫瘤效果。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種糖修飾的葉酸衍生物制備的納米運載顆粒，由糖與葉酸通過碳鏈作為連接橋，利用化學鍵的方式結合形成，且糖與葉酸之間修飾的碳鏈長度可以為2至18個碳原子之間的任意數量。所述納米運載顆粒的化學結構通式如圖1所示。

進一步的，所述糖為還原性糖。

進一步的，所述還原性糖包括五碳糖和六碳糖，脫氧葡萄糖、葡萄糖，氨基葡萄糖，果糖、蔗糖和乳糖。

進一步的，所述化學鍵包括糖苷鍵和酯鍵。

所述納米運載顆粒的合成方法，包括以下步驟：

1)制備乙酰基保護的糖分子

將干燥脫水后的糖加入無水吡啶溶液中，攪拌溶解后，冰浴下將乙酸酐緩慢滴加入溶液中，滴加完畢后撤掉冰浴，室溫下攪拌24小時，然后旋蒸除去溶劑，加入乙酸乙酯溶解剩余固體，然后用檸檬酸水溶液，碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液各萃洗三次，之后乙酸乙酯用無水硫酸鈉干燥過夜，過濾之后減壓除去乙酸乙酯，用柱層析純化，得到乙酰基保護的糖。簡稱化合物2；

2)生成糖分子和連接臂相連接的糖苷鍵

將化合物2溶解于二氯甲烷中，加入一端是溴原子的脂肪醇，冰浴下再滴加入三氟化硼乙醚，滴加完畢后撤除冰浴，室溫下反應24小時，之后加入冷卻過的飽和碳酸氫鈉水溶液終止反應，分離出二氯甲烷層，并用二氯甲烷萃洗水相兩次，合并二氯甲烷并用飽和氯化鈉水溶液萃洗三次之后加入無水硫酸鈉干燥過夜，過濾之后減壓除去二氯甲烷，剩余油狀物用硅膠柱層析純化，洗脫液為石油醚∶乙酸乙酯，從10∶1洗脫至5∶1，得到黃色油狀物，即脂肪醇和糖形成糖苷鍵的化合物，簡稱化合物3；