[發(fā)明專(zhuān)利]超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010172707.6
• 申請(qǐng)日: 2020-03-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111398450A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 成曉亮;李美娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京品生醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38
• 代理公司: 南京思拓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

本發(fā)明涉及一種超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒，包括洗脫液、校準(zhǔn)品溶液、混合內(nèi)標(biāo)液、萃取液和質(zhì)控品，所述8種兒茶酚胺及其代謝物分別為：腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺、變腎上腺素、去甲變腎上腺素、3?甲氧酪胺、高香草酸和香草扁桃酸。采用本發(fā)明的試劑盒檢測(cè)尿液中的8種兒茶酚胺及其代謝物，前處理過(guò)程簡(jiǎn)單，不需要固相萃取或衍生化反應(yīng)，成本低，且靈敏度高、特異性強(qiáng)，前處理10min內(nèi)完成，4.5min之內(nèi)完成8種兒茶酚胺及其代謝物的分離和檢測(cè)，基質(zhì)效應(yīng)與精密度基本滿足要求，可用于臨床上8種兒茶酚胺及其代謝物的定量分析。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于尿液檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒。

背景技術(shù)

腎上腺素(Epinephrine，E)、去甲腎上腺素(Norepinephrine，NE)和多巴胺(Dopamine，DA)是酪氨酸在酶的作用下轉(zhuǎn)化而來(lái)，這3種兒茶酚胺都是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要神經(jīng)遞質(zhì)，在血管張力、腸和支氣管平滑肌張力、心率和收縮力以及葡萄糖代謝等自我調(diào)節(jié)功能中發(fā)揮重要作用。3-甲氧基酪胺(3-Methoxytyramine，3MT)、變腎上腺素(Metanephrine，MN)和去甲變腎上腺素(Normetanephrine，NMN)分別是多巴胺、腎上腺素和去甲腎上腺素的代謝物。這些代謝物進(jìn)一步代謝為香草扁桃酸(Vanillymandelic acid，VMA)和高香草酸(Homovanillic acid，HVA)。

嗜鉻細(xì)胞瘤是一種罕見(jiàn)的、但有潛在致命性的腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤，它可引起高血壓、心悸、嚴(yán)重頭痛和出汗(“發(fā)作”)。嗜鉻細(xì)胞瘤患者也可能無(wú)癥狀，表現(xiàn)為持續(xù)性高血壓或偶然發(fā)現(xiàn)的腎上腺腫塊。嗜鉻細(xì)胞瘤和其他來(lái)源于神經(jīng)嵴細(xì)胞(如副神經(jīng)節(jié)瘤和神經(jīng)母細(xì)胞瘤)的腫瘤分泌兒茶酚胺(腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺)。嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞也有能力將甲基化的兒茶酚胺轉(zhuǎn)化為分泌到尿液循環(huán)中的變腎上腺素。在神經(jīng)母細(xì)胞瘤和相關(guān)腫瘤(神經(jīng)節(jié)神經(jīng)母細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)神經(jīng)瘤)患者中，也可以觀察到1種或幾種兒茶酚胺水平的升高，偶爾在其他神經(jīng)外胚層腫瘤中也可以觀察到。在高度懷疑嗜鉻細(xì)胞瘤的患者中，最好通過(guò)測(cè)量血漿兒茶酚胺來(lái)進(jìn)行篩選。24小時(shí)尿兒茶酚胺可作為低可疑病例的首次檢測(cè)，也可作為血漿兒茶酚胺升高不到2倍的患者的驗(yàn)證性研究。這是非常可取的，因?yàn)槭茹t細(xì)胞瘤人群發(fā)病率較低(每年小于1:100,000人)，檢測(cè)24h尿液兒茶酚胺能避免大量患者接受不必要的、昂貴的、有時(shí)是危險(xiǎn)的成像過(guò)程。

目前關(guān)于尿兒茶酚胺及其代謝物的檢測(cè)種類(lèi)基本在3～5種，而且前處理使用固相萃取，不僅前處理復(fù)雜，而且成本高。人體兒茶酚胺及其代謝物的升高或者降低與嗜鉻細(xì)胞瘤、成交感神經(jīng)瘤、特發(fā)性高血壓、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等疾病有很大相關(guān)性，對(duì)于這些疾病的診斷具體有重要參考價(jià)值，因此開(kāi)發(fā)能一同檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒更具有經(jīng)濟(jì)和應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，提供一種超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述試劑盒在利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒，

所述8種兒茶酚胺及其代謝物分別為：腎上腺素(E)、去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)、變腎上腺素(MN)、去甲變腎上腺素(NMN)、3-甲氧酪胺(3-MT)、高香草酸(HVA)和香草扁桃酸(VMA)。