[發明專利]超高效液相色譜串聯質譜技術檢測尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒

在審

• 申請號: 202010172707.6
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111398450A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 成曉亮;李美娟
• 申請（專利權）人: 南京品生醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

1.一種超高效液相色譜串聯質譜技術檢測尿液中8種兒茶酚胺及其代謝物的試劑盒，

所述8種兒茶酚胺及其代謝物分別為：腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺、變腎上腺素、去甲變腎上腺素、3-甲氧酪胺、高香草酸和香草扁桃酸；

所述的試劑盒包含如下試劑：

(1)洗脫液：

洗脫液A：0.05％～0.1％甲酸水溶液；洗脫液B：乙腈；

(2)校準品溶液：

將包含100μg/mL的腎上腺素、400μg/mL的去甲腎上腺素、2mg/mL的多巴胺、200μg/mL的變腎上腺素、200μg/mL的去甲變腎上腺素、400μg/mL的3-甲氧酪胺、5mg/mL的高香草酸和5mg/mL的香草扁桃酸的混合標準品儲備液以空白尿液基質溶液配制成七個不同濃度點的校準品溶液，所述校準品溶液的七個濃度點為：

腎上腺素七個濃度依次為：0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、25.0ng/mL和50.0ng/mL；

變腎上腺素和去甲變腎上腺素的濃度相同，七個濃度依次為：1.0ng/mL、2.0ng/mL、4.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL和100ng/mL；

去甲腎上腺素和3-甲氧酪胺的濃度相同，七個濃度依次為：2.0ng/mL、4.0ng/mL、8.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、100.0ng/mL和200.0ng/mL；

多巴胺七個濃度依次為：10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL、500.0ng/mL和1000.0ng/mL；

高香草酸和香草扁桃酸的濃度相同，七個濃度依次為：100.0ng/mL、200.0ng/mL、400.0ng/mL、1000.0ng/mL、2000.0ng/mL、5000.0ng/mL和10000.0ng/mL；

(3)混合內標液：

以30％～70％甲醇水溶液分別配制2μg/mL的腎上腺素-d3、8μg/mL的去甲腎上腺素-d6、40μg/mL的多巴胺-d4、4μg/mL的變腎上腺素-d3、4μg/mL的去甲變腎上腺素-d3、8μg/mL的3-甲氧酪胺-d4、800μg/mL的高香草酸-d3、200μg/mL的香草扁桃酸-d3；再將上述內標液各取20μL加入到0.24mL稀釋液中，得混合內標液；

(4)萃取液：

甲酸水溶液或乙酸水溶液；

(5)質控品：

包括QC(L)和QC(H)：

QC(L)為所述混合標準品儲備液以空白尿液基質溶液稀釋至1000倍；

QC(H)為所述混合標準品儲備液以空白尿液基質溶液稀釋至50倍。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，

所述洗脫液A為0.05％～0.5％甲酸水溶液，優選為0.1％甲酸水溶液。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，

所述萃取液為甲酸水溶液；優選為5％～20％甲酸水溶液，更優選為10％甲酸水溶液。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，

所述空白尿液基質為甲酸水溶液或乙酸水溶液；優選為甲酸水溶液；更優選為0.1％～5％甲酸水溶液；特別優選為2％甲酸水溶液。

5.根據權利要求1、2、3或4所述的試劑盒，其特征在于，

所述混合標準品儲備液按照如下方法制備：以30％～70％甲醇水溶液將腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺、變腎上腺素、去甲變腎上腺素、3-甲氧酪胺、高香草酸和香草扁桃酸配制成濃度分別為100μg/mL、400μg/mL、2mg/mL、200μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、5mg/mL和5mg/mL；再將配制好的腎上腺素溶液、去甲腎上腺素溶液、多巴胺溶液、變腎上腺素溶液、去甲變腎上腺素溶液和3-甲氧酪胺溶液各取10μL，高香草酸溶液和香草扁桃酸溶液各取40μL加入到0.86mL稀釋液中，得混合標準品儲備液。