[發明專利]一種無DMSO的冷凍保存液在干細胞凍存中的應用

有效

• 申請號: 202010172535.2
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111793110B
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發明（設計）人: 喬杰;嚴杰;閆麗盈;李蓉;王健君;金晟琳
• 申請（專利權）人: 北京大學第三醫院（北京大學第三臨床醫學院）;中國科學院化學研究所
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062;C07K5/068;C07K5/078;C07K5/083;A01N1/02
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 黃越;焦健

1.一種無DMSO的冷凍保存液在制備干細胞冷凍保存液中的應用，其特征在于，以每100mL體積計，含有仿生控冰材料0.01-50g，多元醇5.0-45mL，水溶性糖 0.1-1.0 mol L^-1，血清0-30mL，余量為緩沖液，所述仿生控冰材料為PVA，或PVA和氨基酸類仿生控冰材料；

所述PVA為無規PVA，所述PVA的間同規整度為15%-60%，所述PVA選自分子量為10-500kDa的PVA；所述PVA選自水解度大于80%的PVA；

所述氨基酸類仿生控冰材料選自聚合度≥2的聚氨基酸、氨基酸、肽類化合物中的一種或兩種以上；

所述肽類化合物為多肽，所述多肽選自L-Thr-L-Arg,L-Thr-L-Pro,L-Arg-L-Thr,L-Pro-L-Thr，L-Thr-L-Arg-L-Thr,L-Thr-L-Pro-L-Thr,L-Ala-L-Ala-L-Thr中的一種或兩種以上。

2.根據權利要求1所述的冷凍保存液在干細胞冷凍保存中的應用，所述仿生控冰材料為PVA，所述PVA含量為0.1-6.0 g。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述多元醇可以為C2-5的多元醇。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述多元醇為乙二醇，丙二醇，丙三醇中的任一種。

5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述水溶性糖為非還原性雙糖、水溶性多糖、糖酐中的至少一種。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述水溶性糖選自蔗糖、海藻糖、羥丙基甲基纖維素、聚蔗糖中至少一種。

7.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述緩沖液為DPBS、hepes-buffered HTF緩沖液、或其他細胞培養緩沖液中的至少一種。

8.根據權利要求1-7任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料為PVA與氨基酸和/或聚氨基酸的組合。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料由0.1-5.0g的PVA和8.0-35g的氨基酸和/或1.0-9.0g聚氨基酸組成。

10.根據權利要求1-7任一項所述的應用，其特征在于，所述PVA的間同規整度為45%-60%。

11.根據權利要求10所述的應用，其特征在于，所述PVA的間同規整度為50%-60%。

12.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述聚氨基酸為聚-L-脯氨酸、聚-L-精氨酸中的一種或兩種的組合。

13.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述聚氨基酸的聚合度為2-40。

14.根據權利要求13所述的應用，其特征在于，所述聚氨基酸的聚合度為2-20。

15.根據權利要求1-7任一項所述的應用，其特征在于，所述多元醇含量為6.0-28 mL。

16.根據權利要求1-7任一項所述的應用，其特征在于，所述血清含量為0。

17.根據權利要求1-7任一項所述的應用，其特征在于，所述水溶性糖含量為0.2-0.5mol L^-1。

18.根據權利要求1-7任一項所述的應用，其特征在于，所述冷凍保存液pH為6.5-7.6。