[發明專利]制備右旋酮洛芬的方法在審
| 申請號： | 202010171547.3 | 申請日： | 2020-03-12 |
| 公開（公告）號： | CN111378637A | 公開（公告）日： | 2020-07-07 |
| 發明（設計）人： | 林潔;王小龍;張枝;楊燕花;麥倩婷;李拓;龐嘉穎;李凱峰;屈代鑫 | 申請（專利權）人： | 東莞市東陽光生物合成藥有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/78 | 分類號： | C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/40;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 肖陽 |
| 地址： | 523871 廣東省東莞市*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 制備 右旋 酮洛芬 方法 | ||
1.一種用于右旋酮洛芬的合成的酶組合，其特征在于，包括：腈水合酶和酰胺酶，所述酰胺酶來源于Agrobacterium.。
2.根據權利要求1所述的酶組合，其特征在于，所述酰胺酶具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
3.一種制備右旋酮洛芬的方法，其特征在于，使酰胺酮洛芬在酰胺酶的催化下進行脫氨基反應，以便獲得右旋酮洛芬，所述酰胺酶來源于Agrobacterium.。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述酰胺酶具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述酰胺酶是以酰胺酶發酵菌體的形式提供的。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述酰胺酶發酵菌體是通過如下方式獲得的：
將轉化有質粒的大腸桿菌菌體進行活化處理，所述質粒中攜帶表達酰胺酶的核酸序列；
將活化處理后菌液進行基礎發酵培養，以便獲得OD600為30～35的基礎發酵培養菌液；
將所述基礎發酵培養菌液進行誘導培養，所述誘導培養是在IPTG存在的條件下進行的，所述誘導培養的時間為14～16h。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述酰胺酮洛芬與酰胺酶發酵菌體的質量比為(0.5～3)：1。
8.根據權利要請求6所述的方法，其特征在于，進一步包括將酰胺酶發酵菌體進行干燥處理，以便獲得菌體干粉；
優選的，所述酰胺酮洛芬與酰胺酶發酵菌體干粉的質量比為(2.5～4.5)：1。
9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述酰胺酮洛芬是通過使氰基酮洛芬在腈水合酶的催化下進行酰胺化反應獲得的。
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