[發明專利]一種具有pH廣泛穩定性的適冷褐藻膠裂解酶AlgL2及其應用

在審

• 申請號: 202010170519.X
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111218439A
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 王海英;王致鵬;紀曉峰
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/42;C12P19/14;C12R1/84
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 梁正賢

1.一種褐藻膠裂解酶AlgL2,其特征在于所述的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.編碼權利要求2所述褐藻膠裂解酶AlgL2的核苷酸序列，所述核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。

3.一種包含權利要求2所述核苷酸序列SEQ ID NO.2的重組質粒AlgL2-ppic9K。

4.一種包含有權利要求1所述重組質粒AlgL2-ppic9K的基因工程菌株，轉化菌株為畢赤酵母GS115。

5.權利要求1所述褐藻膠裂解酶AlgL2在裂解褐藻膠中的應用。

6.根據權利要求5所述的應用，所述褐藻膠裂解酶AlgL2在裂解褐藻膠時反應溫度為20～45℃，

7.根據權利要求6所述的應用，所述褐藻膠裂解酶AlgL2在裂解褐藻膠時pH為3.0～11.0。

8.一種組合酶，包括權利要求1所述的褐藻膠裂解酶AlgL2和偏酸性的纖維素酶。

9.權利要求8所述的組合酶在降解海帶中的應用。

10.權利要求1所述褐藻膠裂解酶AlgL2的制備方法，所述方法具體步驟包括：(1)根據畢赤酵母密碼子使用的偏好性，對來源于弧菌菌屬的褐藻膠裂解酶基因原始序列進行密碼子優化；(2)將優化后的基因進行全合成并構建至表達載體ppic9K中；(3)對構建的表達載體進行酶切線性化后，舍棄含有抗性基因的片段，回收含有褐藻膠裂解酶基因的片段并導入畢赤酵母細胞GS115中，誘導并獲得分泌表達的褐藻膠裂解酶。