[發明專利]蠟梅堿-2，3二酮及其制備方法和醫藥用途

有效

• 申請號: 202010170206.4
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111269230B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 舒任庚;張鵬耀;黃贊興
• 申請（專利權）人: 江西中醫藥大學
• 主分類號: C07D471/22
• 分類號: C07D471/22;A61P31/16
• 代理公司: 南京艾普利德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32297
• 代理人: 張鉑

本發明公開了從山蠟梅的干燥葉中分離得到的一種新的生物堿化合物蠟梅堿?2，3二酮，具有如下結構：體外試驗研究證明本發明所述化合物可抑制甲型流感病毒H1N1復制，具有良好的抗甲型流感病毒H1N1活性。可以進一步研究開發成抗流感病毒藥物。

技術領域

本發明屬于藥物領域，具體涉及從山蠟梅的干燥葉中分離得到的一種新的三生物堿類化合物蠟梅堿-2，3二酮及其制備方法和醫藥用途。

背景技術

甲型流感病毒H1N1是人類最常感染的流感病毒之一，易變異、傳染性強、傳播快、發病率和死亡率高。從世紀以來已出現過數次全球性的大流行，由于我國人口基數大，密集程度大，流行性感冒在我國傳播更加迅猛，給我國人民的健康帶來巨大隱患。

目前，治療甲型流感病毒的藥物主要有兩大類，分別是以離子通道蛋白為靶點的金剛烷胺和金剛乙胺以及以神經氨酸酶為靶點的扎那米韋和奧司他韋。由于流感病毒是分節段的病毒，容易發生變異并容易對現有藥物產生耐藥性，如歐洲已經出現了對金剛烷胺及奧司他韋產生耐藥性的工毒株。此外，現有的抗流感病毒藥物大多具有不同程度的毒副作用，尤其是離子通道阻斷劑具有神經毒性等副作用。因此，研發低毒有效的抗甲型流感的藥物十分迫切。

山蠟梅作為江西的道地藥材，根據七七版《中國藥典》記載山蠟梅葉具有解表祛風，清熱解毒，其在預防感冒、流行性感冒等方面有較好療效。在江西婺源地區，民間常自制山蠟梅茶(又稱毛山茶)用于防治感冒，并具有較好療效。隨著現代科學技術發展，人民對蠟梅屬植物進行現代植物學研究，發現蠟梅屬植物中主要含有萜類、黃酮類、生物堿類、揮發油類、香豆素類等物質，這些化學物質的活性逐漸被發現，現在已廣泛應用于各個領域。雖然蠟梅屬植物中化學成分在各領域的作用都有報道，但其在抗流感病毒方面的卻鮮有報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種從山蠟梅中分離出的具有抗甲型流感病毒H1N1作用的新的生物堿化合物蠟梅堿-2，3二酮。

具有下述結構式的化合物

本發明所述的化合物，可以與酸形成藥學上可成的鹽。可以為有機酸鹽或無機酸鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽，苯甲酸鹽，馬來酸鹽，富馬酸鹽，蘋果酸鹽，檸檬酸鹽，草酸鹽，乳酸鹽，琥珀酸鹽，酒石酸鹽，烷基磺酸鹽、芳基磺酸鹽，氨基酸鹽(如半胱氨酸鹽)等。

本發明的另一個目的在于提供上述化合物的制備方法，包括如下步驟：

(1)取山蠟梅葉，用水和/或醇提取，得提取物；

(2)將步驟(1)所得提取物進行酸提，過濾得酸水部分；

(3)將步驟(2)所得酸水部分用堿調節pH至7-12，使用三氯甲烷萃取，取三氯甲烷部位；

(4)將步驟(3)所得三氯甲烷部分加硅膠H拌樣，裝柱，進行硅膠柱色譜分離，依次采用體積比300:1、300:2、300:4、300:8、300:16、300:32、300:64、300:128、300:250、300:500、300:1000的二氯甲烷-乙醇溶液各洗脫1-3個柱體積(優選2個柱體積)，后再用甲醇洗脫1-5個柱體積(優選3個柱體積)，通過薄層硅膠色譜TCL檢測、合并相同的餾分，依次得到7個餾分；

(5)取步驟(4)所得的第2餾分，通過凝膠柱色譜分離，優選葡聚糖凝膠色譜柱，更優選Sephadex LH-20，采用甲醇溶液洗脫1-5個柱體積(優選3個柱體積)，依次得到兩個餾分，取第2餾分，經半制備高效液相色譜得到權利要求1所述化合物，C18反相色譜柱，流動相為體積比為40:60的甲醇-水溶液，檢測波長230nm。

本發明一個具體的示例，采用半制備HPLC(waters-2489)，ODS柱(5μm，i.d.20mm×250mm，YMC Co.)進行色譜分離，流速為9mL/min。本發明所述化合物的保留時間為37min。