[發(fā)明專利]2019-nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)生物標(biāo)志物及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010169789.9
• 申請(qǐng)日: 2020-03-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111424114A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 唐欣;朱民;雷芙蓉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海力拜生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/686;C12Q1/6806;C12R1/93
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219
• 代理人: 朱凌嬌;許亦琳

本發(fā)明為2019?nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)生物標(biāo)志物及其應(yīng)用，提供冠狀病毒S蛋白基因作為生物標(biāo)志物在制備2019?nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)產(chǎn)品或2019?nCoV冠狀病毒肺炎輔助唾液診斷產(chǎn)品中的用途。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)2019?nCoV新型冠狀病毒基因作為生物標(biāo)志物在制備2019?nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)產(chǎn)品中的作用，能夠快速檢測(cè)2019nCoV新型冠狀病毒感染，樣本易獲得，檢測(cè)效率高，速度快，降低操作人員的感染風(fēng)險(xiǎn)，具有很高的敏感性和特異性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種2019-nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)生 物標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

由于冠狀病毒潛伏期長(zhǎng)、感染者個(gè)體表現(xiàn)差異較大，為迅速/準(zhǔn)確確診帶來(lái)了很大的挑 戰(zhàn)。從衛(wèi)健委公布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第六版)》中我們可以看到多 舉并進(jìn)的總和檢測(cè)方法，分別是：

1)流行病學(xué)史。主要來(lái)確定是否和有嫌疑的人或者場(chǎng)合進(jìn)行過(guò)接觸。

2)個(gè)人生理狀況。主要包括是否有發(fā)熱或者呼吸道癥狀。

3)血液生化檢測(cè)。主要是通過(guò)抽血來(lái)檢測(cè)，比如白細(xì)胞總數(shù)或者淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。

4)肺炎影像學(xué)特。主要是通過(guò)CT設(shè)備來(lái)實(shí)現(xiàn)。

5)核酸檢測(cè)。

臨床診斷策略具有非常重要的意義，針對(duì)病原微生物核酸組分的PCR檢測(cè)方法目前仍然 是確診新冠病毒感染的金標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)家藥監(jiān)局官網(wǎng)顯示，目前已批準(zhǔn)了6家公司的7個(gè)新型冠 狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品及一款檢測(cè)軟件上市，涉及的上市公司有華大基因(300676.SZ)、 達(dá)安基因(002030.SZ)，除了華大基因兩款中的一款是聯(lián)合探針錨定聚合測(cè)序法外，其他均 基于實(shí)時(shí)熒光PT-PCR技術(shù)。萬(wàn)孚生物(300482.SZ)、透景生命(300642.SZ)、西隴科學(xué) (002584.SZ)等公司近日陸續(xù)傳出官方消息，均研制出新冠病毒檢測(cè)相關(guān)產(chǎn)品。

核酸檢測(cè)需要取樣、留樣、保存、核酸提取、上機(jī)檢測(cè)這幾個(gè)步驟，其中每個(gè)步驟都有 可能引起假陰性。尤其是目前在肺部灌洗液無(wú)法規(guī)模化進(jìn)行的緊急時(shí)刻，患者的病毒樣本是 幾乎都通過(guò)鼻咽拭子采集。鼻咽拭子取樣的質(zhì)量因?qū)嶒?yàn)員的操作而異，難以恒定標(biāo)準(zhǔn)化，是 造成檢測(cè)假陰性的重要原因之一。目前新冠病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性率僅為30％-40％左右。此外， 在鼻咽拭子取樣操作中，操作人員很容易受到感染。

因此需要更為簡(jiǎn)單、快速且準(zhǔn)確的取樣方式，從而降低檢測(cè)假陰性，同時(shí)減少采樣人員 被感染的風(fēng)險(xiǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于以上所述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于2019-nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)生 物標(biāo)志物及其應(yīng)用。

既然新冠病毒可以通過(guò)飛沫來(lái)傳播，患者唾液中很可能帶有病毒顆粒和病毒感染細(xì)胞后 細(xì)胞釋放的帶有病毒核酸信息的外泌體。

本發(fā)明的唾液核酸純化試劑(專利)和實(shí)驗(yàn)流程，只需要獲取100微升的唾液上清液， 提取其中的核酸，用目標(biāo)基因的特異性引物對(duì)核酸樣本進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，在兩小時(shí)內(nèi)即可 完成唾液外泌體中含有的與病理狀況相關(guān)的核酸表達(dá)(mRNA)標(biāo)志物以及病原菌特異基因 的檢測(cè)。

為實(shí)現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明第一方面提供冠狀病毒S蛋白基因作為生物標(biāo) 志物在制備2019-nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)產(chǎn)品或2019-nCoV冠狀病毒肺炎輔助唾液診 斷產(chǎn)品中的用途。

本發(fā)明第二方面提供特異性識(shí)別冠狀病毒S蛋白基因的物質(zhì)用于制備2019-nCoV新型冠 狀病毒唾液檢測(cè)產(chǎn)品的用途。

本發(fā)明第三方面提供一種2019-nCoV新型冠狀病毒唾液檢測(cè)試劑盒，所述試劑盒中至少 包括特異性識(shí)別冠狀病毒S蛋白基因的物質(zhì)。