[發明專利]促進毛發再生的外用藥物組合物及制備方法

在審

• 申請號: 202010168237.6
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111135194A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 白晉
• 申請（專利權）人: 白晉
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K31/203;A61K9/00;A61P17/14;A61P17/08;C12N5/0775
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1.一種促進毛發再生的外用藥物組合物，包括間充質干細胞無血清培養基上清，其特征在于，還包括與該間充質干細胞無血清培養基上清聯用的維甲酸。

2.根據權利要求1所述的促進毛發再生的外用藥物組合物，其特征在于，所述的維甲酸的質量分數0.024%~0.026%。

3.一種如權利要求1所述促進毛發再生的外用藥物組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：將干細胞無血清培養基上清分裝后置于4℃保存，與質量分數0.024%~0.026%的維甲酸進行混合，得到最終藥物組合物。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述的間充質干細胞無血清培養基上清的制備過程如下：

S1.沖洗臍帶，去除臍帶表面殘留的血液，剪成5×5×5毫米以下的塊狀，均勻涂布于培養皿上，再緩慢加入α-MEM完全培養基進行培養，確保臍帶組織可以更加均勻，得到待培養樣本；

S2.將S1步驟的待培養樣本置于溫度為37℃且體積分數為5％的二氧化碳飽和濕度培養箱內，直至干細胞長出約占滿細胞培養皿75~85 %面積后，使用0.25 %胰酶消化傳代；

S3.待S2步驟的胰酶消化傳代傳至第三代后，培養48 h后采用低速離心法獲取上清，最終得到間充質干細胞無血清培養基上清。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：S1步驟中所述的α-MEM完全培養基的培養體系為：α-MEM基礎培養基中加入谷氨酰胺 1.8~2.2mM；氫化可的松 49~51μg/L；硫酸鋅 0.9~1.1mg/L；丁酸鈉 1.9~2.1mM；檸檬酸鐵 190~210μM；維生素C 190~210μM；重組人表皮生長因子 19~21μg/L；重組人堿性成纖維細胞生長因子 19~21μg/L；RGD短肽 19~21μg/L；棕櫚酰三肽49~51μg/L；棕櫚酰四肽39~41μg/L；氯化鋰4~6mM；L-谷胱甘肽 3~5mg/L；大豆胰酶抑制劑 90~110mg/L；β-巰基乙醇 2.4~2.6mg/L；乙醇胺 0 .1~0.3g/L；亞硒酸鈉0.00066~ 0.00068mg/L；丙酮酸鈉 0.08~0.12mM；Hepes 0.008~0.012M；NaHCO 32~34mM。

6.根據權利要求4或5所述的制備方法，其特征在于：所述的α-MEM完全培養基的最優培養體系為：谷氨酰胺 2mM；氫化可的松 50μg/L；硫酸鋅 1mg/L；丁酸鈉 2mM；檸檬酸鐵 200μM；維生素C 200μM；重組人表皮生長因子 20μg/L；重組人堿性成纖維細胞生長因子 20μg/L；RGD短肽 20μg/L；棕櫚酰三肽50μg/L；棕櫚酰四肽40μg/L；氯化鋰 5mM；L-谷胱甘肽 4mg/L；大豆胰酶抑制劑 100mg/L；β-巰基乙醇 2.5mg/L；乙醇胺 0 .2g/L；亞硒酸鈉0.00067mg/L；丙酮酸鈉 0.1mM；Hepes 0.01M；NaHCO33mM。