[發明專利]一種酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法

有效

• 申請號: 202010167898.7
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111172209B
• 公開（公告）日: 2021-08-10
• 發明（設計）人: 李道明;劉看看;劉寧;崔俊杰
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 張海平

1.一種酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：在有機溶劑中，采用固定化甘油三酯脂肪酶催化含n-3PUFA的油脂進行甘油解反應，反應結束后，回收有機溶劑并離心收集上層油相；固定化甘油三酯脂肪酶為Novozym435或Lipozyme 435；有機溶劑為叔丁醇或叔戊醇；

步驟2：向步驟1得到的上層油相中加入緩沖液和甘油單酯脂肪酶選擇性催化甘油單酯進行適度水解反應，反應結束后，離心收集上層油相；甘油單酯脂肪酶為MGLP II；

步驟3：將步驟2得到的上層油相進行分子蒸餾純化，收集餾出物，得到甘油單酯型n-3PUFA。

2.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟1中，固定化甘油三酯脂肪酶的添加量為底物油總質量的5～10％，甘油與含n-3PUFA的油脂的摩爾比為5:1，有機溶劑的添加量為底物總質量的2～3倍量mL/g。

3.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟1中的反應，是在40～60℃的反應溫度、300～500rpm的攪拌速度下反應2～6h。

4.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟2中，甘油單酯脂肪酶的用量為200～300U/g底物質量。

5.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟2中，緩沖液為pH＝9.0的Tris-HCl緩沖液，緩沖液加入量為步驟1得到的上層油相質量的30～100wt％。

6.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟2中，反應溫度為40～60℃，反應時間為0.5～2h。

7.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟3中，分子蒸餾純化的反應條件為：進料溫度60℃，進料速度1～2mL/min，冷凝溫度35～40℃，一級蒸發面溫度110℃，二級蒸發面溫度160℃，刮膜電機轉速250～270rpm。

8.根據權利要求1所述的酶法制備甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟3中，一級分子蒸餾的操作壓強≤20Pa，二級分子蒸餾的操作壓強≤5Pa。