[發明專利]一種酶法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA的方法

在審

• 申請號: 202010167155.X
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111172208A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 李道明;劉看看;劉寧;崔俊杰
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 張海平

本發明公開了一種酶法制備2?甘油單酯型n?3 PUFA的方法，屬于酶的分離與應用技術領域。含n?3 PUFA油脂經乙酯化反應、純化后得到含n?3 PUFA的脂肪酸乙酯，再用固定化脂肪酶催化進行轉酯化反應，最后采用固定化脂肪酶進行醇解反應，經萃取、分離，最終得到2?甘油單酯型n?3 PUFA。采用酶法轉酯化制備得到的sn?2位n?3 PUFA含量高的甘油酯混合物作底物制備2?甘油單酯型n?3 PUFA，有效避免了后續純化過程中n?3 PUFA的損失，大大提高了n?3 PUFA的回收率。同時，酶法醇解副產物n?3 PUFA乙酯可回收作為酶法轉酯化的反應底物，大大提高了原料的綜合利用率。

技術領域

本發明屬于油脂加工技術領域，具體涉及一種酶法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA的方法。

背景技術

科學研究表明n-3 PUFA(Polyunsaturated fatty acids，如EPA、DPA和DHA等)對人類發育和生長、視力和細胞膜流動性具有重要作用。此外，n-3 PUFA還具有糾正心律失常、抑制血小板聚集和延長凝血時間、降低血壓、降低血清甘油三酯和血漿同型半胱氨酸水平、抗炎、免疫調節、保護心血管、提高胰島素敏感性和降低乳腺癌和結直腸癌的風險等功能。通常，n-3 PUFA的主要存在形式為游離脂肪酸型、脂肪酸乙酯型及甘油酯型等。研究表明，相比于游離脂肪酸型、甘油三酯型、甘油二酯型和脂肪酸乙酯型，甘油單酯型n-3 PUFA具有更高的生物利用度，且在甘油單酯型n-3 PUFA中，2-甘油單酯型n-3 PUFA相比于1-甘油單酯型n-3 PUFA生物利用度更高。因此，研究制備2-甘油單酯型n-3 PUFA一直是當前的熱點。

生物酶法因其反應條件溫和、催化特異性高及環保等優點近年來引起了廣泛關注。采用生物酶法代替化學法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA可有效避免n-3 PUFA在高溫發生氧化和異構化，并可有效避免2-甘油單酯型n-3PUFA發生酰基轉移生成1-甘油單酯型n-3PUFA。目前，酶法醇解常被用來制備2-甘油單酯型n-3 PUFA。Zhang等(Food Chem.,2018,250:60-66)采用酶法醇解金槍魚油制備2-甘油單酯型n-3 PUFA，產物中2-甘油單酯含量高于90％且產物2-甘油單酯中n-3 PUFA含量為81.13％，但n-3 PUFA回收率僅為50％；Zhang等(Bioresource Technol.,2018,251:334-340)采用酶法醇解藻油制備2-甘油單酯型n-3PUFA，產物中2-甘油單酯含量為95％，且產物2-甘油單酯中n-3 PUFA含量為75.66％，但n-3PUFA回收率僅為63％左右。總之，目前采用海洋魚油或藻油作底物酶法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA時，產物中2-甘油單酯含量可達到90％以上，2-甘油單酯中n-3 PUFA含量可達80％以上，但n-3 PUFA回收率較低，僅為50％左右。

發明內容

為了解決上述現有技術中存在的缺陷，本發明的目的在于提供一種酶法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA的方法，提高了n-3 PUFA的回收率和原料的綜合利用率。

本發明是通過以下技術方案來實現：

一種酶法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA的方法，包括以下步驟：

步驟1：含n-3 PUFA油脂和無水乙醇經堿性催化劑催化進行乙酯化反應，將反應產物純化，得到含n-3 PUFA的脂肪酸乙酯；

步驟2：以甘油和步驟1得到的含n-3 PUFA的脂肪酸乙酯為底物，采用固定化脂肪酶催化底物進行轉酯化反應后，離心收集上層油相；

步驟3：以步驟2收集的上層油相為底物，采用固定化脂肪酶進行醇解反應后，經萃取、分離，得到2-甘油單酯型n-3 PUFA。

優選地，步驟1中，堿性催化劑采用NaOH，NaOH的質量為含n-3 PUFA的油脂的0.2～0.4％；乙醇與含n-3 PUFA油脂的摩爾比為6～9:1。