[發明專利]一種酶法制備2-甘油單酯型n-3 PUFA的方法

在審

• 申請號: 202010167155.X
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111172208A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 李道明;劉看看;劉寧;崔俊杰
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 張海平

1.一種酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：含n-3PUFA油脂和無水乙醇經堿性催化劑催化進行乙酯化反應，將反應產物純化，得到含n-3PUFA的脂肪酸乙酯；

步驟2：以甘油和步驟1得到的含n-3PUFA的脂肪酸乙酯為底物，采用固定化脂肪酶催化底物進行轉酯化反應后，離心收集上層油相；

步驟3：以步驟2收集的上層油相為底物，采用固定化脂肪酶進行醇解反應后，經萃取、分離，得到2-甘油單酯型n-3PUFA。

2.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟1中，堿性催化劑采用NaOH，NaOH的質量為含n-3PUFA的油脂的0.2～0.4％；乙醇與含n-3PUFA油脂的摩爾比為6～9:1。

3.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟1中，乙酯化反應的溫度為70～75℃，反應時間為1.5～2h。

4.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟1中，純化為四級分子蒸餾純化，其中，四級的進料流速分別為3mL/min、2mL/min、1mL/min和0.5mL/min，蒸發面溫度分別為110℃、140℃、150℃和160℃，操作壓強分別為30Pa、15Pa、5Pa和1Pa。

5.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟2和步驟3所用固定化脂肪酶為Novozym 435或Lipozyme435。

6.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟2中，含n-3PUFA的脂肪酸乙酯與甘油的摩爾比為3:1，加酶量為2～5％底物總質量，反應溫度為55～65℃，反應時間為12～24h。

7.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟3中，醇解反應中，所用醇為乙醇，上層油相與乙醇的質量比為1:2.5～3，加酶量為6～10wt％底物總質量，反應溫度為25～30℃，反應時間為1.5～3h。

8.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟3中，萃取的具體步驟為：先向醇解反應產物中加入正己烷，再加入乙醇，然后再用正己烷洗滌數次。

9.根據權利要求8所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，乙醇的體積分數為85％。

10.根據權利要求1所述的酶法制備2-甘油單酯型n-3PUFA的方法，其特征在于，步驟3中，分離是采用旋轉蒸發或減壓蒸餾。