[發(fā)明專利]降糖靈口服液指紋圖譜檢測方法及其指紋圖譜

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010166676.3
• 申請(qǐng)日: 2020-03-11
• 公開（公告）號(hào): CN111239294B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張志;梁學(xué)政;盧森華;張洪平;毛桂福;吳敏;甘洋縈;張蓓;李俊偉;陶曉靜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 柳州市中醫(yī)醫(yī)院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 柳州市集智專利商標(biāo)事務(wù)所 45102
• 代理人: 黃桂云

1.一種降糖靈口服液指紋圖譜檢測方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）混合對(duì)照品溶液的制備：

精密稱定葛根素10.05mg、毛蕊異黃酮葡萄糖苷10.08mg，分別置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得到葛根素貯備液和毛蕊異黃酮葡萄糖苷貯備液；再分別精密量取上述葛根素貯備液1.0mL、毛蕊異黃酮葡萄糖苷貯備液1.0mL，并置于同一10mL容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，得到混合對(duì)照品溶液；

（2）供試品溶液的制備：

精密量取降糖靈口服液10.0mL于分液漏斗中，用水飽和正丁醇萃取 3次，每次25 mL，合并萃取液，用水飽和正丁醇洗滌兩次，每次25ml，棄去洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至 5mL量瓶中，加甲醇至刻度，濾過，取續(xù)濾液過0.45微孔的濾膜，得到供試品溶液；

（3）高效液相色譜條件為：

色譜柱：CAPCELL PAK C18 MGⅡ，4.6×250mm5μm；

測定波長：254nm；

柱溫：25℃；

進(jìn)樣體積：5μL；

流動(dòng)相：0.2 %磷酸水溶液-甲醇；

流速：1.0mL/min；

采用梯度洗脫方式洗脫50min，梯度洗脫程序見表1：

表1 梯度洗脫程序

（4）標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立：

將12批降糖靈口服液分別按照上述步驟（2）制成供試品溶液，同時(shí)將葛根素、毛蕊異黃酮葡萄糖苷按照上述步驟（1）制得混合對(duì)照品溶液，將制得的12批供試品溶液和混合對(duì)照品溶液分別注入高效液相色譜儀中，按照上述步驟（3）的高效液相色譜條件進(jìn)行檢測，分別記錄50min內(nèi)混合對(duì)照品溶液和這個(gè)12批供試品溶液的圖譜及數(shù)據(jù)，并將得到的這些圖譜及數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)中進(jìn)行分析，建立降糖靈口服液的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；

（5）待測降糖靈口服液的質(zhì)量檢測：

將待測降糖靈口服液按照上述步驟（2）制成待測供試品溶液，同時(shí)將葛根素、毛蕊異黃酮葡萄糖苷按上述步驟（1）制成混合對(duì)照品溶液，將制得的測供試品溶液和混合對(duì)照品溶液分別注入高效液相色譜儀中，按照上述步驟（3）的高效液相色譜條件進(jìn)行檢測，分別記錄50min內(nèi)測供試品溶液和混合對(duì)照品溶液的圖譜及數(shù)據(jù)，將得到的這些圖譜及數(shù)據(jù)與上述步驟（4）建立的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜比較，計(jì)算相似度，識(shí)別所具有的共同吸收峰的數(shù)量，確定相似度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的降糖靈口服液指紋圖譜檢測方法，其特征在于：所述降糖靈口服液是以生地黃、黃芪、天冬、天花粉、枸杞子、覆盆子、粉葛、熟地黃、澤瀉為有效成分原料制成的。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的降糖靈口服液指紋圖譜檢測方法，其特征在于：結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)分析法對(duì)所述降糖靈口服液的質(zhì)量進(jìn)行分析。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的降糖靈口服液指紋圖譜檢測方法，其特征在于：所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析法包括聚類分析法和主成分分析法。