[發(fā)明專利]一種先天性無虹膜致病基因突變檢測試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010164873.1
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111321215A
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 原慧萍;王琦;邵正波;劉鑫娜;孫禹
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 馬鑫

1.一種先天性無虹膜致病基因突變檢測試劑盒，包括：25mM dNTPs，10×PCR反應(yīng)緩沖液，DNA聚合酶，PCR擴(kuò)增引物對和ddH₂O，其特征在于，所述的PCR擴(kuò)增引物對由引物1和引物2組成，其中，引物1的核苷酸序列為SEQ ID NO:1所示，引物2的核苷酸序列為SEQ ID NO:2所示，所述的致病基因是PAX6基因，PAX6基因的cDNA的NCBI參考序列號為NM_000280.3，所對應(yīng)的蛋白質(zhì)NCBI參考序列號為NP_000271.1，以cDNA第一個(gè)核苷酸作為1計(jì)算，該基因第2外顯子的第140位腺嘌呤核苷酸突變?yōu)榘奏ず塑账?，即c.140AC。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，突變前PAX6基因第2外顯子及其臨近的內(nèi)含子核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，突變后PAX6基因的第2外顯子及其臨近的內(nèi)含子核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒利用PCR技術(shù)進(jìn)行先天性無虹膜致病基因的擴(kuò)增，反應(yīng)程序?yàn)椋?/p>

98℃預(yù)變性2分鐘，然后進(jìn)入第一個(gè)循環(huán)：98℃變性10秒、63℃退火復(fù)性15秒、72℃延伸15秒，共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)，72℃1min，4℃保存。

4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的試劑盒在制備先天性無虹膜致病基因突變檢測試劑中應(yīng)用。