[發(fā)明專利]一種miRNA的檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010164650.5 | 申請日： | 2020-03-11 |
| 公開（公告）號： | CN111321205A | 公開（公告）日： | 2020-06-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 高婷婷;裴和中;張國亮;楊秀華 | 申請（專利權(quán)）人： | 昆明理工大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/6851 | 分類號： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 昆明人從眾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 53204 | 代理人： | 王娟 |
| 地址： | 650093 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 mirna 檢測 方法 | ||
1.一種miRNA的檢測方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
（1）使肽核酸與碳量子點通過酰胺化學(xué)鍵共價偶聯(lián)，得到CQDs-PNA；采用FAM標(biāo)記DNA，得到FAM-DNA；
（2）將CQDs-PNA和FAM-DNA加入到鹽溶液體系中進(jìn)行雜交，雜交得到混合溶液I，I混合溶液中CQDs-PNA生物探針濃度為3~4μg/mL，F(xiàn)AM-DNA的濃度為180~200nmol/L；
（3）向所述混合溶液I中加入目標(biāo)miRNA，室溫孵育20~30min，得到混合溶液II；
（4）采用已知濃度的待檢測目標(biāo)miRNA為樣品，測定檢測體系的熒光強度，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=－0.062x+0.95；
（5）測量混合溶液II的熒光強度，并與建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，測定待檢測目標(biāo)miRNA的濃度，當(dāng)所測濃度為0時，代表不存在待檢測目標(biāo)miRNA。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述miRNA的檢測方法，其特征在于：所述鹽溶液體系為100mM Tris-HCl溶液體系，所述鹽溶液體系的pH為6.9~7.4。
3.根據(jù)權(quán)利根據(jù)權(quán)利要求1所述miRNA的檢測方法，其特征在于：所述碳量子點尺寸為2~4 nm的球形顆粒。
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