[發明專利]豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的融合蛋白、類病毒顆粒和疫苗及制備方法

有效

• 申請號: 202010164198.2
• 申請日: 2020-03-10
• 公開（公告）號: CN111253494B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 賀筍;閆鵬先;張國慶;潘毅平;郭苗苗;肖升東;趙毅;李延濤
• 申請（專利權）人: 天康制藥（蘇州）有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/81;A61K39/135;A61K39/15;A61P31/14;C12R1/84
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 王新哲

本發明涉及分子生物學領域，具體而言，提供了一種豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的融合蛋白、類病毒顆粒和疫苗及制備方法。本發明提供的融合蛋白包括豬口蹄疫病毒的抗原表位和豬輪狀病毒的VP6蛋白，且該融合蛋白能夠自行裝配成類病毒顆粒。本發明以豬輪狀病毒的VP6蛋白為載體，嵌合上豬口蹄疫病毒的抗原表位后獲得融合蛋白，該融合蛋白可以自行裝配成類病毒顆粒，使豬口蹄疫病毒的抗原表位能夠展示到該類病毒顆粒的表面，得到的類病毒顆粒對豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒均具有很好的免疫原性。由該類病毒顆粒制備得到的疫苗為二聯疫苗，使得動物同時獲得豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的免疫原性，免疫效果好。

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，具體而言，涉及一種豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的融合蛋白、類病毒顆粒和疫苗及制備方法。

背景技術

口蹄疫(foot-and-mouth disease，FMD)，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。主要侵害偶蹄獸，常見的如豬、牛、羊等，偶見于人和其他動物。其臨診特征為口腔粘膜、蹄部和乳房皮膚發生水皰。該病傳播途徑多、速度快，曾多次在世界范圍內暴發流行，造成巨大政治、經濟損失。鑒于此，世界動物衛生組織(OIE)將其列為A類傳染病之首。目前，有三分之二的OIE成員國流行FMD，時刻威脅著無FMD國家和地區的家畜安全和畜產品貿易。

豬輪狀病毒病是由輪狀病毒感染引起的一種以腹瀉為特征的傳染性人畜共患病，輪狀病毒(Rotavirus，RV)在豬群中廣泛存在，有明顯的季節流行性，多發于7-14日齡的仔豬，發病率約50％-80％，死亡率約15％，臨床上以萎頓、厭食、嘔吐、腹瀉和脫水、體重減輕為特征。輪狀病毒病呈世界性分布并極難凈化，引起嚴重經濟損失。

目前市場上口蹄疫疫苗以O/A二價滅活疫苗和O/A二價合成肽疫苗為主，輪狀病毒則無商品化的疫苗。其中，在各種預防口蹄疫的疫苗中，用基因工程技術制備亞單位疫苗是近幾十年較為成功的方向，類病毒顆粒疫苗(VLP)則是亞單位疫苗中免疫原性最強、效果最突出、具有廣闊應用前景的基因工程疫苗。雖然制備口蹄疫類病毒顆粒有多條技術路線，然而口蹄疫病毒顆粒較差的熱穩定性和酸穩定性限制了口蹄疫VLP疫苗在放大和生產等方面的應用。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的融合蛋白及其制備方法和其相關生物材料。

本發明的第二目的在于提供融合蛋白或生物材料的應用。

本發明的第三目的在于提供一種豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的類病毒顆粒及其制備方法。

本發明的第四目的在于提供一種抗豬口蹄疫和豬輪狀病毒病的類病毒顆粒疫苗。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種豬口蹄疫病毒和豬輪狀病毒的融合蛋白，其包括豬口蹄疫病毒的抗原表位和豬輪狀病毒的VP6蛋白，且所述融合蛋白能夠自行裝配成類病毒顆粒。

進一步地，所述抗原表位包括VP1蛋白抗原表位129-166aa和VP1蛋白抗原表位196-213aa；

優選地，所述抗原表位選自O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位129-166aa和O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位196-213aa；

所述O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位129-166aa的氨基酸序列為SEQ ID NO.1，所述O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位196-213aa的氨基酸序列為SEQ ID NO.2；

優選地，所述VP6蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO.3；

優選地，所述VP6蛋白的核苷酸序列為SEQ ID NO.4；

優選地，所述融合蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO.5；