[發明專利]藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備及其應用

在審

• 申請號: 202010162261.9
• 申請日: 2020-03-10
• 公開（公告）號: CN111249461A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 黃劍東;祝登輝;林晨;張雅
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K9/14;A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 修斯文;蔡學俊

1.藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于，具體操作步驟如下：

（1）活化二氫卟酚e6

稱取一定量的Ce6、N-羥基琥珀酰亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基丙胺)碳二亞胺加入到DMSO溶液中，超聲使其充分溶解，于常溫避光攪拌活化一段時間，得到Ce6衍生物；

（2）配制藻藍蛋白溶液

按照Ce6:藻藍蛋白不同摩爾比的分別稱取若干藻藍蛋白溶解于PBS中，超聲使其充分溶解，離心，取上清液測電子吸收光譜，定量藻藍蛋白的濃度；

（3）制備藻藍蛋白-二氫卟酚e6溶液；

取出活化的Ce6衍生物，加到攪拌中的藻藍蛋白溶液中，反應過夜；

（4）制備藻藍蛋白-二氫卟酚e6粉末；

取出反應后溶液，離心，取上清液在水中透析，除去游離的Ce6、N-羥基琥珀酰亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基丙胺)碳二亞胺，取透析后的溶液冷凍，凍干，得到復合物粉末，于-20℃保存。

2.根據權利要求1所述的藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中N-羥基琥珀酰亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基丙胺)碳二亞胺、Ce6的摩爾比為5:5:1；所述DMSO加入量為500 μL 。

3.根據權利要求1所述的藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中的于常溫避光攪拌活化一段時間是指于常溫避光攪拌活化1h，得到其衍生物。

4.根據權利要求藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中的Ce6:藻藍蛋白摩爾比為5:1、10:1、20:1中的任意一種，PBS用量為5 mL。

5.根據權利要求藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中的定量藻藍蛋白濃度，是指在10000轉離心三分鐘，取上清液測電子吸收光譜，定量藻藍蛋白的濃度為20 μM。

6.根據權利要求1所述的藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中反應過夜是指取出活化的Ce6衍生物，緩慢滴加到攪拌中的藻藍蛋白溶液中，于4℃條件下反應24h。

7.根據權利要求1所述的的藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）中的取出反應后溶液，離心，取上清液在水中透析是指24h后，取出反應后溶液，10000轉離心三分鐘，取上清液在水中透析3天,截留分子量為3500Da。

8.一種如權利要求1~7任一項所述制備方法獲得的藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒在用于制備腫瘤光動力治療試劑材料和光動力藥物上的應用。

9.一種如權利要求1~7任一項所述制備方法獲得的藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒在組建腫瘤光動力治療的系統上的應用，其特征在于：所述系統包括藻藍蛋白-二氫卟酚e6共價納米顆粒的試劑材料，激光光源。

10.根據權利要9所述的應用，其特征在于：所述激光光源為提供光敏劑激發波長的光源，激光光源的激發光波長為600-820nm，能量密度范圍為0.05-0.5W/cm²。