[發明專利]用于H-FABP定量檢測的試劑盒、H-FABP定量檢測的方法

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• 申請號: 202010161735.8
• 申請日: 2020-03-10
• 公開（公告）號: CN111289758A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 江運強
• 申請（專利權）人: 蘇州翊訊生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 無錫市匯誠永信專利代理事務所(普通合伙) 32260
• 代理人: 許云峰

本發明公開了一種用于H?FABP定量檢測的試劑盒及一種H?FABP定量檢測的方法。本發明的用于H?FABP定量檢測的試劑盒包括試劑條，在試劑條上包含有若干容納槽體，本發明的試劑盒還包括分別預存于不同的容納槽體中的磁微粒試劑、標記試劑、清洗液和堿性磷酸酶的發光底物，磁微粒試劑由抗H?FABP一抗包被的磁珠制備得到，標記試劑由經過活化處理的抗H?FABP二抗和經過活化處理的堿性磷酸酶制備得到。利用本發明的試劑盒進行檢測時，操作簡單，出結果快，且檢測結果準確，檢測精密度高。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，具體涉及一種用于H-FABP定量檢測的試劑盒和H-FABP定量檢測的方法。

背景技術

近年來，急性冠狀動脈綜合癥的發病率越來越高，其病情發展迅速，如不能及時做出治療將會對患者帶來生命危險。在我國，急性冠狀動脈綜合癥的發病率約50/10萬，據統計，每年我國死于急性心肌梗死的人數超過100萬。

對急性冠狀動脈綜合癥的確診時間長短直接關系到治療效果。目前，用于急性冠狀動脈綜合癥的生化指標主要有肌紅蛋白、肌鈣蛋白和肌酸激酶同工酶。但是，肌紅蛋白的半衰期很短，易于得到假陽性的檢測結果。而肌鈣蛋白和肌酸激酶同工酶的檢測時間均較長，尤其是，肌酸激酶同工酶更是要在心肌受損時長超過6小時才會進入血液中，因而，造成了臨床診斷結果的判斷的延誤。

心型脂肪酸結合蛋白(H-FABP)是富含于心臟中的一種新型小胞質蛋白，其具有高度心臟特異性，在心肌缺血性損傷出現后，H-FABP可在胸痛發作后1至3小時出現在血液中，因而，H-FABP可作為一種在心肌損傷早期診斷的有效標志物。

目前，對H-FABP檢測技術常用的方法有如下幾種：放射免疫測定法(RIA)、熒光免疫測定法(FIA)、酶聯免疫測定法(ELISA)、免疫膠體金技術、膠乳增強免疫比濁法等。其中，膠乳增強免疫比濁法因其成本較低，且檢測耗時短，因而在目前使用最為廣泛，但是其精密度和靈敏度較差。但是，其他檢測方法則存在檢測成本高、耗時長的缺陷，且對操作人員的專業度要求較高。

發明內容

為克服上述缺點，本發明的目的在于提供一種用于H-FABP定量檢測的試劑盒，其檢測靈敏度高，檢測性能穩定，檢測結果準確。

本發明的用于H-FABP定量檢測的試劑盒，包括至少一根試劑條，在每根所述試劑條上均包含有若干容納槽體，所述試劑盒還包括分別預存于不同的容納槽體中的磁微粒試劑、標記試劑和發光底物，所述磁微粒試劑由抗H-FABP一抗包被的磁珠制備得到，所述標記試劑由抗H-FABP二抗和堿性磷酸酶制備得到。

進一步的，所述磁微粒試劑按如下方法制備而來：

將抗H-FABP一抗和磁珠以及EDC混合并經充分孵育后,集磁去上清，加入封閉劑孵育后集磁去上清，再加入磁珠保存液后即制得磁微粒試劑半成品；

再將磁微粒試劑半成品分散于磁珠緩沖液中，即制備得到磁微粒試劑。

更進一步的，所述磁珠為羧基磁珠，所述抗H-FABP一抗、所述磁珠和所述EDC的質量比為1-5:50-500:1-50，所述封閉劑為CE210。

更進一步的，所述磁珠緩沖液的配方組分包括TRIS、NaCl、吐溫20、BSA和Proclin-300。

進一步的，所述標記試劑由經過活化的抗H-FABP二抗和經過活化的堿性磷酸酶混合，并經充分連接后制備得到。

更進一步的，制備所述標記試劑的抗H-FABP二抗經2-IT溶液活化處理得到，制備所述標記試劑的堿性磷酸酶經過SMCC試劑活化處理得到。