[發(fā)明專利]一種他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010156050.4
• 申請(qǐng)日: 2020-03-09
• 公開（公告）號(hào): CN111398443A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周鑫;張冠軍;許娜娜;吳凌鵬;孫向陽(yáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京華蓋制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38;G01N30/86
• 代理公司: 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32224
• 代理人: 劉妍妍

本發(fā)明涉及藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定方法，包括以下步驟：精密稱取乙二胺四乙酸二鈉對(duì)照品和和氯化銅，分別制備成標(biāo)準(zhǔn)乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備液溶液和標(biāo)準(zhǔn)氯化銅儲(chǔ)備液溶液；精密量取他氟前列素滴眼液，加入乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備液和標(biāo)準(zhǔn)氯化銅儲(chǔ)備液溶液，制備成對(duì)照品溶液；精密量取乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備液和標(biāo)準(zhǔn)氯化銅儲(chǔ)備液溶液，制備成供試品溶液，制備成對(duì)照品溶液用高效液相色譜儀分別測(cè)定各不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液和供試品溶液；求得其對(duì)應(yīng)的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的含量。本發(fā)明提供的測(cè)定方法具有操作簡(jiǎn)單、精密度好、回收率高、檢測(cè)限低等特點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定方法。

背景技術(shù)

乙二胺四乙酸二鈉又名依地酸二鈉，是一種重要絡(luò)合劑，用于化學(xué)電鍍、洗滌劑、凈水劑、PH調(diào)節(jié)劑、阻凝劑等，在藥物制劑中用于穩(wěn)定劑，它能有效增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性，其原理為依地酸二鈉可以與金屬離子形成穩(wěn)定的水溶性螯合物，能夠防止自身的氧化，有利于提高藥物在制備、存儲(chǔ)和臨床配制過(guò)程中的穩(wěn)定性。然而，由于乙二胺四乙酸二鈉可對(duì)粘膜、上呼吸道、眼睛及皮膚產(chǎn)生刺激作用，長(zhǎng)期大量應(yīng)用乙二胺四乙酸二鈉超標(biāo)的產(chǎn)品可能對(duì)人體健康產(chǎn)生不良影響。另外，乙二胺四乙酸二鈉還可與鈣離子結(jié)合成可溶的絡(luò)合物，以減少血鈣濃度，能夠引起低鈣血癥；所以應(yīng)嚴(yán)格控制乙二胺四乙酸二鈉的含量限度范圍。目前，乙二胺四乙酸二鈉的檢測(cè)方法包括氣相色譜法、高效液相色譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等。采用氣相色譜法測(cè)定，前處理方法需采用有機(jī)溶劑提取或柱前衍生，處理復(fù)雜；采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，成本較高；采用液相色譜法具有操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，是目前應(yīng)用最廣泛的一種測(cè)定乙二胺四乙酸鈉的方法。乙二胺四乙酸二鈉的結(jié)構(gòu)式如下：

目前，乙二胺四乙酸二鈉的檢測(cè)方法包括氣相色譜法、高效液相色譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等。采用氣相色譜法測(cè)定，前處理方法需采用有機(jī)溶劑提取或柱前衍生，處理復(fù)雜；采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，成本較高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種具有操作簡(jiǎn)單、精密度好、回收率高、檢測(cè)限低等特點(diǎn)的測(cè)定他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉含量的液相色譜方法，可用于他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的含量控制。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種液相色譜檢測(cè)他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的方法，用高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，采用外標(biāo)法定量法分析，具體包括以下步驟：

精密稱取乙二胺四乙酸二鈉對(duì)照品和氯化銅，分別制備成標(biāo)準(zhǔn)乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備液溶液和標(biāo)準(zhǔn)氯化銅儲(chǔ)備液溶液；

精密量取他氟前列素滴眼液，分別加入乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備液溶液和標(biāo)準(zhǔn)氯化銅儲(chǔ)備液溶液，制備成對(duì)照品溶液；

精密量取乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備液溶液和標(biāo)準(zhǔn)氯化銅儲(chǔ)備液溶液，制備成供試品溶液；

用高效液相色譜儀分別測(cè)定各不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液和供試品溶液；分別記錄標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液的濃度和對(duì)應(yīng)的峰面積，和供試品溶液的峰面積；對(duì)照品儲(chǔ)備液溶液的各質(zhì)量濃度及色譜圖峰面積進(jìn)行線性回歸分析，得回歸方程和相關(guān)系數(shù)，制作出標(biāo)準(zhǔn)曲線；

利用外標(biāo)法從供試品溶液的峰面積求得其對(duì)應(yīng)的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的含量。

進(jìn)一步的，高效液相色譜儀測(cè)定時(shí)采用梯度洗脫。

進(jìn)一步的，流動(dòng)相A為0.66％四丁基氫氧化銨-乙腈(1～3):1，流動(dòng)相B為甲醇-水(8～9):1。

進(jìn)一步的，按下述過(guò)程進(jìn)行梯度洗脫：0～11分鐘，流動(dòng)相A從體積分?jǐn)?shù)90％～100％，流動(dòng)相B從體積分?jǐn)?shù)10％～0％；11～15分鐘，流動(dòng)相A體積分?jǐn)?shù)0％～10％，流動(dòng)相B從體積分?jǐn)?shù)90％～100％；15～25分鐘，保持為0％～10％，流動(dòng)相B保持為90％～100％。