[發明專利]一種他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法

在審

• 申請號: 202010156050.4
• 申請日: 2020-03-09
• 公開（公告）號: CN111398443A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 周鑫;張冠軍;許娜娜;吳凌鵬;孫向陽
• 申請（專利權）人: 南京華蓋制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38;G01N30/86
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 劉妍妍

1.一種他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，包括以下步驟：

精密稱取乙二胺四乙酸二鈉對照品和氯化銅，分別制備成標準乙二胺四乙酸二鈉儲備液溶液和標準氯化銅儲備液溶液；

精密量取他氟前列素滴眼液，分別加入乙二胺四乙酸二鈉儲備液溶液和標準氯化銅儲備液溶液，制備成對照品溶液；

精密量取乙二胺四乙酸二鈉儲備液溶液和標準氯化銅儲備液溶液，制備成供試品溶液；

用高效液相色譜儀分別測定各不同濃度的標準對照品溶液和供試品溶液；分別記錄標準對照品溶液的濃度和對應的峰面積，和供試品溶液的峰面積；對照品儲備液溶液的各質量濃度及色譜圖峰面積進行線性回歸分析，得回歸方程和相關系數，制作出標準曲線；

利用外標法從供試品溶液的峰面積求得其對應的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的含量。

2.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，高效液相色譜儀測定時采用梯度洗脫。

3.根據權利要求2所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，流動相A為0.66％四丁基氫氧化銨-乙腈(1～3):1，流動相B為甲醇-水(8～9):1。

4.根據權利要求3所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，按下述過程進行梯度洗脫：0～11分鐘，流動相A從體積分數90％～100％，流動相B從體積分數10％～0％；11～15分鐘，流動相A體積分數0％～10％，流動相B從體積分數90％～100％；15～25分鐘，保持為0％～10％，流動相B保持為90％～100％。

5.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，檢測波長為250～260nm；流速為0.5～1.5mL/min；進樣量為10～50μL。

6.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，回歸方程為y＝10.05x+29.621，相關系數R²為0.9999。

7.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，標準乙二胺四乙酸二鈉儲備液溶液的制備步驟為：精密稱取乙二胺四乙酸二鈉對照品適量，用純化水超聲溶解成50～60mg/mL的溶液；加水定容至刻度，搖勻，備用。

8.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，標準氯化銅儲備液溶液的制備步驟為：精密稱取氯化銅對照品適量，用純化水超聲溶解成0.05～0.1％的溶液；加水定容至刻度，搖勻，備用。

9.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，供試品溶液的制備步驟為：精密量取0.1uL～20uL乙二胺四乙酸二鈉儲備液溶液和0.1mL～1mL標準氯化銅儲備液溶液，置于容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻，備用。

10.根據權利要求1所述的他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二鈉的測定方法，其特征在于，對照品溶液的制備步驟為：精密量取0.1mL～2mL他氟前列素滴眼液，分別加入0.1uL～20uL乙二胺四乙酸二鈉儲備液溶液和0.1mL～1mL標準氯化銅儲備液溶液，置于容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻，備用。