[發明專利]一種利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法

在審

• 申請號: 202010149846.7
• 申請日: 2020-03-06
• 公開（公告）號: CN111239125A
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發明（設計）人: 岳婉晴;張文先;李秀平
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 吳爽;徐冬濤

1.一種利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，首先利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖生產葡萄糖酸和過氧化氫，再用二硫化鉑為催化劑催化生成的過氧化氫與顯色劑的顯色反應來檢測葡萄糖的濃度。

2.根據權利要求1所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，主要包括如下步驟：

步驟1，首先對樣品進行預處理，加磷酸二氫鈉緩沖溶液稀釋后，再加入葡萄糖氧化酶溶液混合、反應；

步驟2，加入的二硫化鉑溶液，顯色劑以及的磷酸二氫鈉緩沖液進行顯色反應；

步驟3，通過目視比色法或者紫外-可見分光光度計法檢測。

3.根據權利要求2所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述步驟3中，目視比色法是指，將顯色反應后的溶液顏色直接與比色標準系列進行比較，或在顯色反應后加入硫酸溶液終止反應，再采用目視比色法半定量測定葡萄糖的濃度。

4.根據權利要求3所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述比色標準系列的制備方法如下：是將葡萄糖標準品加磷酸二氫鈉緩沖液稀釋，配制成已知的不同濃度的葡萄糖標準溶液與葡萄糖氧化酶混合反應后，加入二硫化鉑溶液、顯色劑和緩沖液進行顯色反應即得比色標準系列，或在顯色反應后加入硫酸溶液終止反應得到比色標準系列。

5.根據權利要求2所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述步驟3中，紫外-可見分光光度計法是指顯色反應結束后，直接測定溶液的吸光度，或在顯色反應后加入硫酸溶液終止反應，再采用紫外-可見分光光度計測定溶液的吸光度，并根據標準曲線方程計算葡萄糖的含量。

6. 根據權利要求5所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述標準曲線方程的建立是將葡萄糖標準品加磷酸二氫鈉緩沖液稀釋，配制成已知的不同濃度的葡萄糖標準溶液與葡萄糖氧化酶混合反應后，加入二硫化鉑溶液、顯色劑和緩沖液，顯色反應后直接采用紫外-可見分光光度計測定在652 nm波長處的吸光度，或在顯色反應后加入硫酸溶液終止反應，再采用紫外-可見分光光度計在450 nm波長處測定吸光度，并以吸光度作為縱坐標，葡萄糖的濃度作為橫坐標，繪制標準曲線并得出標準曲線方程。

7. 根據權利要求2所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述步驟1和步驟3中，所用磷酸二氫鈉緩沖溶液的pH值為3-9，濃度為0.1 mM。

8. 根據權利要求2所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述步驟2中，所用磷酸二氫鈉緩沖溶液的pH值為2-7，濃度為25 mM。

9.根據權利要求2所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述步驟2中，顯色反應所用的顯色劑為3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺、2,2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽或鄰苯二胺中的任意一種。

10.根據權利要求2所述的利用二硫化鉑的葡萄糖比色檢測法，其特征在于，所述步驟2中，顯色反應的溫度為20~70℃。