[發(fā)明專利]一種棉花葉蜜腺相關(guān)的分子標(biāo)記InDel-GaNEC1、引物對(duì)及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010149636.8
• 申請(qǐng)日: 2020-03-06
• 公開（公告）號(hào): CN111197103A
• 公開（公告）日: 2020-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊召恩;胡偉;秦文強(qiáng);李付廣;王鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州中鼎萬策專利代理事務(wù)所(普通合伙) 41179
• 代理人: 徐文婷

1.一種棉花葉蜜腺性狀相關(guān)的分子標(biāo)記InDel-GaNEC1，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。

2.一種權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記InDel-GaNEC1在棉花分子標(biāo)記輔助育種中的應(yīng)用。

3.一種權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記InDel-GaNEC1在選育棉花有無葉蜜腺品種中的應(yīng)用。

4.一種檢測權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記InDel-GaNEC1的引物對(duì)，其特征在于，由正向引物InDel-GaNEC1-F和反向引物InDel-GaNEC1-R組成。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述引物對(duì)，其特征在于，正向引物InDel-GaNEC1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，反向引物InDel-GaNEC1-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

6.一種權(quán)利要求4所述引物對(duì)在棉花分子標(biāo)記輔助育種中的應(yīng)用。

7.一種權(quán)利要求4所述引物對(duì)在選育棉花有無葉蜜腺品種中的應(yīng)用。

8.一種利用權(quán)利要求4所述引物對(duì)鑒別棉花葉蜜腺性狀的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)提取待測棉花葉片的基因組DNA；

(2)以提取的基因組DNA為模板，利用引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

(3)將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳，根據(jù)電泳條帶，鑒別棉花葉蜜腺性狀。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的鑒別棉花葉蜜腺性狀的方法，其特征在于，

PCR反應(yīng)體系：dd H₂O 20.2μl、10×Buffer(含Mg²⁺)2.5μl、dNTPs(25mM)0.15μl、Taq酶(5U/μl)0.15μl、10mM正向引物InDel-GaNEC1-F 0.5μl、10mM反向引物InDel-GaNEC1-R 0.5μl、模板1.0μl；

PCR反應(yīng)程序：94℃預(yù)變性5min；94℃變性30s，52℃退火30s，72℃延伸20s，運(yùn)行35個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸3min。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的鑒別棉花葉蜜腺性狀的方法，其特征在于，鑒別棉花葉蜜腺性狀的方法為：當(dāng)目的條帶為一條，且目的條帶長158bp時(shí)，可以確定待測棉花具有正常的葉蜜腺；當(dāng)目的條帶為一條，且目的條帶長143bp時(shí)，可以確定待測棉花不具有葉蜜腺；當(dāng)目的條帶為兩條，且目的條帶的長度分別為158bp和143bp時(shí)，可以確定待測棉花具有正常的葉蜜腺。