[發(fā)明專利]一種高爾基體蛋白73的測定試劑盒及其化學(xué)發(fā)光測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010148039.3
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111273033A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖文峰;胡國茂;王國建
• 申請（專利權(quán)）人: 北京森美希克瑪生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 覃蛟

本發(fā)明公開了一種高爾基體蛋白73的測定試劑盒及其化學(xué)發(fā)光測定方法，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，該測定試劑盒包括有磁微粒試劑、GP73結(jié)合抗體以及GP73標(biāo)記抗體，其將磁微粒技術(shù)與吖啶酯標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合，有效縮短了高爾基體蛋白73的檢測時間，且檢測的靈敏度高，特異性強，穩(wěn)定性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種高爾基體蛋白73的測定試劑盒及其化學(xué)發(fā)光測定方法。

背景技術(shù)

GP73(Golgi Protein73)是存在于高爾基體的一種Ⅱ型跨膜蛋白，分子量73KD，已證實GP73是一種糖基化蛋白，其螺旋卷曲結(jié)構(gòu)域上的N109和N144可以發(fā)生巖藻糖基化，糖基化可能與其功能密切相關(guān)。螺旋卷曲結(jié)構(gòu)提示該蛋白可通過胞外區(qū)域與其它蛋白相互作用。

2000年Kladney研究表明，在正常的人體肝組織中，GP73主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，而肝細(xì)胞表達(dá)很少甚至不表達(dá)，肝細(xì)胞受到病毒感染后可引起GP73的表達(dá)上調(diào)。2005年Block等發(fā)現(xiàn)，在肝癌患者血清中GP73水平顯著升高。在各種原因引發(fā)的肝臟疾病，包括病毒性和非病毒性肝炎、肝硬化及原發(fā)性肝癌的肝臟組織中GP73的表達(dá)均顯著增高，GP73與肝臟炎癥程度和肝纖維化的進(jìn)程呈正相關(guān)，因此GP73是肝臟炎疾病輔助診斷的一個很好指標(biāo)。

現(xiàn)有的高爾基體蛋白73(GP73)測定試劑盒主要采用的是酶聯(lián)免疫分析技術(shù)或酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)。

酶聯(lián)免疫分析技術(shù)，即采用辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標(biāo)記GP73蛋白抗體，用另一配對的GP73蛋白抗體包被酶聯(lián)反應(yīng)微孔板，然后在反應(yīng)板微孔中加入血清樣本，經(jīng)過雙抗體夾心免疫反應(yīng)后，樣本中的GP73蛋白被抗體聯(lián)結(jié)到酶聯(lián)反應(yīng)板微孔上，洗滌后加入底物顯色液，若樣本中含有GP73蛋白，則反應(yīng)微孔板就會顯色，反之則不顯色。而顯色的深淺，與樣本中GP73蛋白的含量正相關(guān)，因此，可以根據(jù)反應(yīng)孔顏色深淺，判斷樣本中GP73蛋白含量的水平。

酶聯(lián)免疫分析技術(shù)是傳統(tǒng)的經(jīng)典免疫分析技術(shù)，其具有簡單、方便、直觀和成本低的優(yōu)點，但同時也存在一些缺陷，如靈敏度低，反應(yīng)時間長，重復(fù)性差，檢測范圍窄以及穩(wěn)定性不好等問題。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種高爾基體蛋白73的測定試劑盒及其化學(xué)發(fā)光測定方法。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

第一方面，實施例提供一種高爾基體蛋白73的測定試劑盒，其包括：磁微粒試劑、GP73結(jié)合抗體以及GP73標(biāo)記抗體；

所述磁微粒試劑包括由磁微粒與異硫氰酸熒光素抗體偶聯(lián)制成的磁微粒；

所述GP73結(jié)合抗體包括由GP73抗體與異硫氰酸熒光素偶聯(lián)制成的抗體；

所述GP73標(biāo)記抗體包括由吖啶類化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物標(biāo)記的GP73抗體。

第二方面，實施例提供一種高爾基體蛋白73的化學(xué)發(fā)光測定方法，其包括采用如前述實施例所述的高爾基體蛋白73的測定試劑盒對待測樣品進(jìn)行測定。

本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明實施例提供了一種高爾基體蛋白73的測定試劑盒，其包括有磁微粒試劑、GP73結(jié)合抗體以及GP73標(biāo)記抗體；該測定試劑盒將磁微粒技術(shù)與吖啶標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合，有效縮短了高爾基體蛋白73的檢測時間，且檢測的靈敏度高，特異性強，穩(wěn)定性好。

具體實施方式

為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。