[發明專利]膽堿脯氨酸離子液體修飾磁性納米材料及其結合HPLC對愛普列特的檢測方法

有效

• 申請號: 202010147853.3
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111413422B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發明（設計）人: 高清;朱霞石
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36;G01N30/74
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 劉妍妍

本發明為藥物分析領域，公開了一種膽堿脯氨酸離子液體修飾磁性納米材料及其結合HPLC對愛普列特的檢測方法。將膽堿脯氨酸離子液體[Ch][Pro]通過交聯劑1，6?亞己基二異氰酸酯(HDI)修飾至Fe₃O₄@SiO₂表面，將該材料用于萃取實際樣品中愛普列特，并結合高效液相色譜?紫外檢測器進行測定其含量。結果顯示：Fe₃O₄@SiO₂@HDI@[Ch][Pro]納米粒子能快速吸附愛普列特，實際樣品中愛普列特的萃取率可達到96％以上，該方法的檢出限為2.0ng mL^?1，線性范圍為0.01?20μg mL^?1，富集倍數為13。本方法成功應用于藥片及血清樣品中愛普列特的測定。

技術領域

本發明涉及一種膽堿氨基酸離子液體修飾磁性納米材料分離分析愛普列特的方法，屬于藥物分析領域。

背景技術

愛普列特是一種選擇性的類固醇II型5α-還原酶抑制劑，用于治療良性前列腺增生癥，其化學名為：17β-(N-叔丁基-氨基-甲酰基)雄甾-3,5-二烯-3-羧酸。臨床表明，該藥能明顯改善良性前列腺增生患者的排尿癥狀，增加尿流率，減少剩余尿量，用藥后2個月有明顯療效，無嚴重藥物不良反應，是治療良性前列腺增生癥的理想藥物，具有廣闊的應用前景。愛普列特在給藥后0.25小時可測出其存在于血清中，3-4小時血藥濃度達峰值，消除相半衰期為7.5小時。現已開發檢測愛普列特的方法有：高效液相色譜法，熒光法。

由于基質干擾以及生物樣品中愛普列特濃度太低而無法直接測定，常需要與有效的預濃縮技術結合分離富集復雜樣品中的愛普列特。常用分離富集技術主要包括液相萃取技術和固相萃取技術。其中固相萃取(SPE)技術具有實驗步驟方便、萃取材料種類多、可重復使用、富集回收率高等優勢。磁性固相萃取技術(MSPE)作為固相萃取的分支，與傳統的SPE相比，MSPE具有分離簡便的優勢。

發明內容

本發明的目的在于提出一種以膽堿脯氨酸離子液體修飾的磁性納米材料，及其結合HPLC對愛普列特的檢測方法，所述材料及檢測方法能較好地萃取愛普列特，萃取率較高。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種膽堿脯氨酸離子液體修飾磁性納米材料制備方法，制備方法為：將膽堿脯氨酸離子液體通過交聯劑1，6-亞己基二異氰酸酯修飾至Fe₃O₄@SiO₂表面獲得膽堿脯氨酸離子液體修飾磁性納米材料Fe₃O₄@SiO₂@HDI@[Ch][Pro]。

進一步的，所述方法包括以下步驟：

將氯化膽堿溶于去離子水，隨后將氯化膽堿水溶液經過陰離子交換柱逐滴加至脯氨酸水溶液中；冰浴條件下攪拌上述水溶液6-12h后得到產物，真空干燥得到膽堿脯氨酸離子液體[Ch][Pro]；

將制得的[Ch][Pro]與Fe₃O₄@SiO₂納米粒子分散在DMSO中，加入1，6-亞己基二異氰酸酯，繼續攪拌24-48h；用磁鐵將反應產物從溶劑中分離出來，用甲醇洗滌，干燥后制得Fe₃O₄@SiO₂@HDI@[Ch][Pro]。

進一步的，[Ch][Pro]與Fe₃O₄@SiO₂納米粒子的質量比為2:1。

進一步的，氯化膽堿與脯氨酸的摩爾比為1:1。

進一步的，所述陰離子交換柱采用1-2mol/L NaOH水溶液沖洗。