[發(fā)明專(zhuān)利]一種干式同型半胱氨酸測(cè)試卡及其應(yīng)用在審
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010147017.5 | 申請(qǐng)日: | 2020-03-05 |
公開(kāi)(公告)號(hào): | CN111855648A | 公開(kāi)(公告)日: | 2020-10-30 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 鄒繼華;劉獻(xiàn)文;薛楊波;王幸媛;賈江花;方亮 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 美康生物科技股份有限公司 |
主分類(lèi)號(hào): | G01N21/78 | 分類(lèi)號(hào): | G01N21/78 |
代理公司: | 寧波甬致專(zhuān)利代理有限公司 33228 | 代理人: | 沈春紅 |
地址: | 315104 浙江省寧*** | 國(guó)省代碼: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索關(guān)鍵詞: | 一種 半胱氨酸 測(cè)試 及其 應(yīng)用 | ||
一種干式同型半胱氨酸測(cè)試卡及其應(yīng)用,包括解離液R1和干化學(xué)試紙,所述解離液R1包括還原劑、絲氨酸和緩沖液;所述干化學(xué)試紙包括支持層、層析膜、酶墊、濾血層、酶循環(huán)反應(yīng)層、擴(kuò)散層和塑料片;所述的層析膜、酶墊、濾血層、酶循環(huán)反應(yīng)層和擴(kuò)散層依次從下至上疊合在支持層上,所述的層析膜的長(zhǎng)度大于酶墊、濾血層、酶循環(huán)反應(yīng)層和擴(kuò)散層的長(zhǎng)度,層析膜固定于靠近支持層的一端、并向著支持層的另一端延伸;所述的支持層上遠(yuǎn)離酶墊的一端附近設(shè)置有塑料片,所述的塑料片上設(shè)置有顯色區(qū),塑料片位于層析膜的上方并與之平行設(shè)置,且顯色區(qū)遮蓋層析膜的部分區(qū)域。具有可檢測(cè)人體血液中全部同型半胱氨酸、敏感性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,具體地說(shuō)涉及一種干式同型半胱氨酸測(cè)試卡及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
同型半胱氨酸(HCY)是血液中的一種含硫分子的氨基酸,由蛋氨酸轉(zhuǎn)化而成。在體內(nèi)經(jīng)蛋氨酸脫甲基化生成,主要通過(guò)再甲基化和轉(zhuǎn)硫途徑代謝。需蛋氨酸合成酶、胱硫醚β合成酶(CBS)及維生素B12、葉酸、維生素B6參與。酶功能障礙或維生素的缺乏等均可導(dǎo)致同型半胱氨酸升高。正常情況下HCY會(huì)迅速轉(zhuǎn)化成谷胱甘肽和S-腺苷蛋氨酸。這是生物體內(nèi)非常重要的兩種物質(zhì),與肝臟解毒、體內(nèi)垃圾——自由基的清除、修復(fù)DNA有著密切的關(guān)系。HCY的升高,就意味著這兩種物質(zhì)的缺乏,將會(huì)給健康帶來(lái)極大的損害。因此,同型半胱氨酸是我們健康的風(fēng)向標(biāo)。
目前檢測(cè)同型半胱氨酸的方法有很多,包括高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法、循環(huán)酶法。這些方法中或需要借助價(jià)格昂貴的大型儀器檢測(cè)如高效液相色譜法、化學(xué)發(fā)光法、循環(huán)酶法,或操作復(fù)雜繁瑣如酶聯(lián)免疫吸附法,以上方法均不能滿(mǎn)足基層醫(yī)院檢驗(yàn)場(chǎng)所對(duì)檢測(cè)方法的快速便捷的需求。
中國(guó)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局網(wǎng)站上也公開(kāi)了一些適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的同型半胱氨酸檢測(cè)方法。其中中國(guó)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局網(wǎng)站上公開(kāi)了一種定量測(cè)定同型半胱氨酸的電化學(xué)試紙及其制備方法(公開(kāi)號(hào)CN104931549A);中國(guó)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局網(wǎng)站上還公開(kāi)了一種同型半胱氨酸干化學(xué)法檢測(cè)試紙條及其制備方法(公開(kāi)號(hào)CN101592656A)。以上兩種方法操作方便、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,但存在一個(gè)重大缺陷即同型半胱氨酸在血液中大部分通過(guò)二硫鍵與蛋白結(jié)合形成氧化型同型半胱氨酸,而上述申請(qǐng)文件中均未使用還原劑對(duì)氧化型同型半胱氨酸進(jìn)行還原,因而它們只能檢測(cè)血液樣本中游離的還原型同型半胱氨酸的含量,其臨床敏感性較差。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述不足,提供一種可檢測(cè)人體血液中全部同型半胱氨酸、敏感性強(qiáng)的干式同型半胱氨酸測(cè)試卡。
為了解決上述技術(shù)問(wèn)題,本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:一種干式同型半胱氨酸測(cè)試卡,包括解離液R1和干化學(xué)試紙,所述解離液R1包括還原劑、絲氨酸和緩沖液;所述干化學(xué)試紙包括支持層、層析膜、酶墊、濾血層、酶循環(huán)反應(yīng)層、擴(kuò)散層和塑料片;所述的層析膜、酶墊、濾血層、酶循環(huán)反應(yīng)層和擴(kuò)散層依次從下至上疊合在支持層上,所述的層析膜的長(zhǎng)度大于酶墊、濾血層、酶循環(huán)反應(yīng)層和擴(kuò)散層的長(zhǎng)度,層析膜固定于靠近支持層的一端、并向著支持層的另一端延伸;所述的支持層上遠(yuǎn)離酶墊的一端附近設(shè)置有塑料片,所述的塑料片上設(shè)置有顯色區(qū),塑料片位于層析膜的上方并與之平行設(shè)置,且顯色區(qū)遮蓋層析膜的部分區(qū)域。
采用上述結(jié)構(gòu),本發(fā)明的反應(yīng)原理為:樣本中氧化型的同型半胱氨酸(HCY)被R1中的還原劑還原為游離HCY,當(dāng)還原后樣本加入到酶循環(huán)反應(yīng)層時(shí),在酶循循環(huán)層中,游離HCY在胱硫醚-β-合成酶作用下和絲氨酸反應(yīng)生成L-胱硫醚,后者在胱硫醚--β-裂解酶作用下生成HCY、丙酮酸和氨,HCY會(huì)促使上述反應(yīng)往復(fù)循環(huán)下去;酶循環(huán)反應(yīng)層產(chǎn)生的丙酮酸隨著液體的下滲流到酶墊,在酶墊中,丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下生成乙酰磷酸、過(guò)氧化氫和二氧化碳;酶墊中產(chǎn)生的丙酮酸流到層析膜上,此時(shí)壓按塑料片的顯色區(qū)域,使得顯色區(qū)域與層析膜接觸,顯色區(qū)域上攜帶的顯色底物被液體溶解釋放到層析膜上,顯色底物在過(guò)氧化物酶催化下與過(guò)氧化氫發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化,通過(guò)檢測(cè)顯色區(qū)域的顏色變化量來(lái)定量檢測(cè)HCY。
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G01N 借助于測(cè)定材料的化學(xué)或物理性質(zhì)來(lái)測(cè)試或分析材料
G01N21-00 利用光學(xué)手段,即利用紅外光、可見(jiàn)光或紫外光來(lái)測(cè)試或分析材料
G01N21-01 .便于進(jìn)行光學(xué)測(cè)試的裝置或儀器
G01N21-17 .入射光根據(jù)所測(cè)試的材料性質(zhì)而改變的系統(tǒng)
G01N21-62 .所測(cè)試的材料在其中被激發(fā),因之引起材料發(fā)光或入射光的波長(zhǎng)發(fā)生變化的系統(tǒng)
G01N21-75 .材料在其中經(jīng)受化學(xué)反應(yīng)的系統(tǒng),測(cè)試反應(yīng)的進(jìn)行或結(jié)果
G01N21-84 .專(zhuān)用于特殊應(yīng)用的系統(tǒng)
- 軟件測(cè)試系統(tǒng)及測(cè)試方法
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- 一種軟件測(cè)試的方法、裝置及電子設(shè)備
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- 測(cè)試裝置及測(cè)試系統(tǒng)
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