[發明專利]一種基于循環酶速率法測定HCY的試劑盒及其制備使用方法

在審

• 申請號: 202010145870.3
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111304283A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 芮雙印;任傳伍
• 申請（專利權）人: 安徽大千生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/48
• 分類號: C12Q1/48;C12Q1/34;C12Q1/32
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

本發明涉及生物檢測試劑制備領域，提供了一種基于循環酶速率法測定HCY的試劑盒，包括試劑R1和試劑R2。試劑R1包括緩沖液、S?腺苷甲硫氨酸、NADH、三(2?羧乙基)膦氯化氫、防腐劑、穩定劑、表面活性劑。試劑R2包括緩沖液、無機鹽、S?腺苷同型半胱氨酸水解酶、a?酮戊二酸、谷氨酸脫氫酶、HCY甲基轉移酶、腺苷脫氨酶、防腐劑、穩定劑、表面活性劑。本發明還提供了一種基于循環酶速率法測定HCY的試劑盒的制備使用方法。本發明試劑盒用于測定HCY的含量，其操作簡便、檢測速度快、精密度高、易于自動化，且適于大批量標本同時檢測。

技術領域

本發明涉及生物檢測試劑制備領域，尤其涉及一種基于循環酶速率法測定HCY的試劑盒及其制備使用方法。

背景技術

同型半胱氨酸(HCY)在血漿中分兩種形式存在：“氧化型同型半胱氨酸”和“還原型同型半胱氨酸”。還原型同型半胱氨酸中游離的巰基具有高度活性，其容易氧化，從而形成二硫化物的形式。氧化型是同型半胱氨酸在血漿中的主要存在形式，以二硫化物形式或是與蛋白質共價結合的形式存在。

HCY可使氧化自由基大量產生引起內皮細胞損傷，使脂質過氧化和氧化型的低密度增加，從而對血管造成的損傷和破壞。在HCY的作用下，破損的血管壁生成了斑塊，促進動脈粥狀硬化。

HCY主要臨床應用如下：

1、心血管病防治

(1)HCY升高與動脈粥樣硬化(AS)的關系

1969年就曾有人從尸檢中發現2例血漿HCY濃度超過正常人幾十倍的病人存在廣泛的動脈粥樣硬化和動脈血栓。臨床上發現，高胱氨酸尿癥病人早年多因全身動脈粥樣硬化和血栓形成死于腦梗塞和心肌梗塞，這與血中HCY升高有關。

(2)HCY水平與心血管疾病的危險性

通過血管內超聲觀察AS斑塊情況觀察到，當血漿HCY濃度8umol/L時，斑塊較小(0.17-0.76mm)；當血漿HCY濃度8umol/L時，斑塊明顯增大(0.27-1.04，p0.001)，表明與冠狀動脈病變程度呈正相關。輕度、中度HCY水平升高可使心血管疾病死亡危險性增加4-6倍，血漿總HCY水平每升高5μmol/L，則CHD危險性男性增加60％，女性增加80％。

2、HCY與神經系統疾病

腦血管病是目前嚴重危害人類健康的主要疾病。近年來，隨著分子生物學的深入發展，HCY在腦卒中的作用日益受到重視，普遍認為血漿HCY15umol/L為高HCY血癥，普通人群血漿HCY水平升高者只有不到5％，而在腦卒中患者中可達30-40％

HCY的升高是與中風有重要關聯的危險因子。美國最新的數據顯示中年后期男性中風發病率，處于55-64這個年齡段的男性相對于45-54年齡段的男性而言，前者患中風的幾率是后者的三倍。

高HCY是造成老年癡呆癥與帕金森的重要因素。

3、糖尿病及并發癥防治

國內外大量研究結果顯示，血漿HCY水平可作為2-型糖尿病患者患大血管疾病的獨立危險因素。

監測糖尿病患者HCY水平，有利于對其預后的評估。HCY升高在糖尿病伴腎臟、視網膜及血管并發癥的患者更為嚴重。高HCY血癥也能促進糖尿病微血管并發癥的發生與發展。

4、慢性腎衰并發癥防治

慢性腎功能衰竭(CRF)患者普遍有高HCY血癥，其發生率是正常人33倍。

尿毒癥時，一方面肝臟蛋氨酸腺苷轉移酶活性升高，導致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面腎功能下降，使HCY代謝的必需產物-絲氨酸合成減少，導致HCY代謝受抑制引起HCY的堆積。

5、肺血栓栓塞癥防治