[發明專利]一種長效緩釋的聚乙二醇修飾抗腫瘤藥物及其制備方法

在審

• 申請號: 202010145349.X
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111110857A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 林金新;楊建民;黃達;田永奇
• 申請（專利權）人: 福建齊衡科技有限公司
• 主分類號: A61K47/60
• 分類號: A61K47/60;A61K47/69;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 裴金華

本發明公開了一種長效緩釋的聚乙二醇修飾抗腫瘤藥物及其制備方法，包括用以定點修飾抗腫瘤蛋白的鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇，其制備方法包括以下步驟：S1.制備鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇；S2.用所述鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇定點修飾抗腫瘤蛋白；S3.純化，分離，用于提高PEG化蛋白質藥物的緩釋效果，長時間維持穩定的血藥濃度。

技術領域

本發明屬于藥物領域，具體涉及一種長效緩釋的聚乙二醇修飾抗腫瘤藥物及其制備方法。

背景技術

隨著生物技術的發展，蛋白類生物藥物因其高活性、強特異性、生物功能明確、低毒性等優勢正越來越廣泛地被開發和應用。然而，諸如半衰期短、穩定性差、水溶性差、存在免疫原性、腎清除速率快等問題卻限制了其進一步發展。為了解決這些問題，研究者們進行了多方面的嘗試，蛋白藥物的聚乙二醇修飾是其中最重要的化學修飾技術之一。聚乙二醇修飾又稱PEG化，是將聚乙二醇聚合物連接到一些生物分子（比如肽，蛋白質和抗體片段）上的過程，旨在改善上述蛋白藥物的問題，為此誕生了一系列聚乙二醇衍生物。

PEG對蛋白抗腫瘤藥物的修飾可有效降低蛋白藥物的免疫原性，改變藥物的半衰期，可控釋放的PEG衍生物實質是在PEG與目標分子之間引入可降解的化學鍵，使得修飾后產物在進入人體內后可在一定條件下降解（如酶解、水解等），釋放蛋白藥物，維持蛋白藥物的活性，延長半衰期，即提高緩釋率。

現有技術的PEG化蛋白質藥物多為對蛋白分子表面游離氨基進行隨機非定點修飾的產品，如申請號為CN201310154747.8的“一種聚乙二醇修飾的蛋白質藥物的修飾位點的測定方法”，測定了聚乙二醇修飾蛋白不同位點的效果，雖然聚乙二醇成功修飾了蛋白藥物且不改變其活性，但其半衰期延長效果不佳，一方面是由于以蛋白質的氨基與PEG之間的化學鍵較弱，易于在短時間內降解；另一方面是由于蛋白表面的氨酸殘基較多，可修飾位點過多，導致修飾產物不均一，修飾率不高，部分未修飾的蛋白質藥物直接進行機體內作用，降低了具備緩釋效果的藥物的濃度，為維持血藥濃度，需頻繁服用。

因此，研制新型的PEG定點修飾的藥物蛋白，對延長其緩釋作用十分必要。

發明內容

本發明提供一種長效緩釋的聚乙二醇修飾抗腫瘤藥物及其制備方法，提高PEG化蛋白質藥物的緩釋效果，長時間維持穩定的血藥濃度。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是，一種長效緩釋的聚乙二醇修飾抗腫瘤藥物，包括用以定點修飾抗腫瘤蛋白的鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇，蛋白表面的反應性基團多呈親核性，親核活性從大到小為：巰基＞α－氨基＞ε－氨基＞羧基＞羥基，因此，巰基為藥物蛋白的最佳反應位點，通過對聚乙二醇進行改性，使得改性后的聚乙二醇能與蛋白質的巰基加成反應，鍵能強，降解條件高時間長，降解速率慢，緩釋效果好。

優選地，所述聚乙二醇的分子量為5kDa-20kDa，若聚乙二醇分子量太大，由于聚乙二醇鏈長增長空間位阻增大，會遮蔽蛋白表面的一些基團，則修飾后的蛋白藥物水解活力會下降，若聚乙二醇分子量太小，則起不到降低蛋白免疫原性的作用；

優選地，所述抗腫瘤蛋白含有半胱氨酸，半胱氨酸的存在可避免鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇直接作用于蛋白質的二硫鍵，從而影響蛋白質的三級結構，對于本身含有半胱氨酸的蛋白藥物可將半胱氨酸直接作為靶點與鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇進行作用，若不含半胱氨酸的蛋白藥物則可通過基因工程手段改造出游離半胱氨酸，基因工程改造一些不影響蛋白質活性的氨基酸定點突變為半胱氨酸的研究較為成熟，因此在本方案中不進行贅述。

進一步地，還提供一種長效緩釋的聚乙二醇修飾抗腫瘤藥物的制備方法，包括以下步驟：

S1.制備鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇；

S2.用所述鄰苯二酚結構官能化聚乙二醇定點修飾抗腫瘤蛋白；

S3.純化，分離。