[發(fā)明專利]新型冠狀病毒2019-nCoV核酸試劑盒和病毒核酸采集方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010141882.9 | 申請日： | 2020-03-04 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111378783A | 公開（公告）日： | 2020-07-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳偉;胡立強(qiáng);鄭小小;王翔 | 申請（專利權(quán)）人： | 杭州美中疾病基因研究院有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/70 | 分類號(hào)： | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 杭州九洲專利事務(wù)所有限公司 33101 | 代理人： | 陳繼亮 |
| 地址： | 310058 浙江省杭州市西湖區(qū)余杭*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 新型 冠狀病毒 2019 ncov 核酸 試劑盒 病毒 采集 方法 | ||
1.一種新型冠狀病毒2019-nCoV核酸試劑盒，其特征在于：根據(jù)新型冠狀病毒2019-nCoV ORF1ab和N基因作為擴(kuò)增靶區(qū)域，設(shè)計(jì)特異性引物及熒光探針用于樣品中新型冠狀病毒2019-nCoV核酸的檢測；
Target 1(ORF1ab):
正向引物(F)：CCCTGTGGGTTTTACACTTAA
反向引物(R)：ACGATTGTGCATCAGCTGA
熒光探針(P)：5'-HEX-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1-3'
Target 2(N基因):
正向引物(F)：GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT
反向引物(R)：CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG
熒光探針(P)：5'-FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-BHQ1-3'。
2.一種采用如權(quán)利要求1所述的新型冠狀病毒2019-nCoV核酸試劑盒的病毒核酸采集方法，其特征在于：采用一步法對2019-nCoV核酸RNA進(jìn)行Digital PCR絕對定量，將稀釋后的陽性病毒樣品RNA進(jìn)行Digital PCR檢測，以標(biāo)本病毒RNA以900nM的引物終濃度和300nM的探針終濃度為最佳反應(yīng)濃度，ORF1ab探針和N基因的探針在溫度為60.0℃時(shí)進(jìn)行退火處理；通過ORF1ab和N基因兩組特異性探針對2019-nCoV進(jìn)行檢測；組別分為陽性、陰性質(zhì)控品及待檢樣品，檢測結(jié)果判定：待檢樣品的HEX和FAM熒光通道均為陽性，可判定為待檢樣品2019n-CoV病毒核酸陽性，且陽性質(zhì)控品通道為陽性，陰性質(zhì)控品通道為No call；相反，待檢樣品判定為陰性。
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