[發明專利]一種香豆素-苯并吡喃鎓鹽衍生物及其合成方法和應用

在審

• 申請號: 202010140972.6
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111253356A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 陰彩霞;張偉杰;霍方俊
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07D311/16
• 分類號: C07D311/16;C09K11/06;G01N21/31;G01N21/64
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 張福增

本發明提供了一種香豆素?苯并吡喃鎓鹽衍生物及其合成方法和應用，所述衍生物的中文名稱為(E)?2?(4?(4?(2?氰基?3?(7?(二乙氨基)?2?氧代?2H?鉻?3?基)丙烯酰基)哌嗪?1?基)苯基)?7?(二乙氨基)高氯酸鉻，英文名稱為(E)?2?(4?(4?(2?cyano?3?(7?(diethylamino)?2?oxo?2H?chromen?3?yl)acryloyl)piperazin?1?yl)phenyl)?7?(diethylamino)chromenylium perchlorate，命名為CM?BP。本發明還提供了一種香豆素?苯并吡喃鎓鹽衍生物的合成方法，還提供了區分識別檢測谷胱甘肽和二氧化硫的方法以及在二氧化硫代謝成像中的應用?？稍趐H＝7.4的PBS溶液中，通過熒光分光光度計定量檢測谷胱甘肽和二氧化硫的含量。該檢測過程簡便、靈敏、快速，檢測結果準確度高。

技術領域

本發明涉及熒光探針合成、谷胱甘肽和二氧化硫檢測，特別涉及一種香豆素-苯并吡喃鎓鹽衍生物及其合成方法和在區分檢測谷胱甘肽和二氧化硫中的應用。

背景技術

研究表明，谷胱甘肽是細胞內含量最為豐富的非蛋白硫醇，在維持細胞內氧化還原平衡中起著重要作用，其濃度失衡與一系列疾病有關：包括免疫反應、癌癥和老年癡呆癥等。毫無疑問，谷胱甘肽在細胞內的代謝異常是引起其濃度失衡的直接因素。線粒體內谷胱甘肽和硫代硫酸鈉在硫代硫酸鹽轉移酶作用下生成二氧化硫。二氧化硫作為一種重要的小分子活性硫化物，具有多種病理活性，如抗菌、抗高血壓、抗氧化以及對心肌缺血再灌注損傷的保護作用等，內源性產生的二氧化硫可以增強細胞抗氧化作用，并且在信號傳導過程中起重要作用。然而，細胞內亞硫酸鹽氧化酶缺乏會導致二氧化硫代謝異常，人體內亞硫酸鹽累積會損害腦、神經系統等重要器官，甚至造成死亡。因此，開發有效的方法監測細胞內谷胱甘肽和二氧化硫代謝過程，對于生物研究和臨床診斷起著至關重要的作用。

應生物體系中二氧化硫水平檢測的要求，設計選擇性好、準確度高且低細胞毒性的熒光探針，已成為生物醫學發展中具有挑戰性的前沿課題之一。

發明內容

本發明的目的在于提供一種香豆素-苯并吡喃鎓鹽衍生物及其合成方法，以及將該衍生物作為探針用于區分識別檢測谷胱甘肽和二氧化硫。

本發明提供的一種香豆素-苯并吡喃鎓鹽衍生物，所述衍生物的中文名稱為(E)-2-(4-(4-(2-氰基-3-(7-(二乙氨基)-2-氧代-2H-鉻-3-基)丙烯酰基)哌嗪-1-基)苯基)-7-(二乙氨基)高氯酸鉻，英文名稱為(E)-2-(4-(4-(2-cyano-3-(7-(diethylamino)-2-oxo-2H-chromen-3-yl)acryloyl)piperazin-1-yl)phenyl)-7-(diethylamino)chromenylium perchlorate，命名為CM-BP，結構式為：

本發明提供的一種香豆素-苯并吡喃鎓鹽衍生物CM-BP的合成方法，包括如下步驟：

(1)按摩爾比1：1-1.5將4-醛基-7二乙氨基香豆素和氰乙酸溶解在無水乙醇中，加入少量哌啶做催化劑，將混合物在85℃加熱反應3-4小時；反應完成后將溶劑減壓旋干，所得橙色固體用體積比1:15的甲醇與二氯甲烷作洗脫劑經硅膠柱色譜分離得橙色固體粉末，即為(E)-2-氰基-3-(7-(二乙氨基)-2-氧代-2H-鉻-3-基)丙烯酸；

(2)按摩爾比1：1-1.5將4-二乙氨基水楊醛和4-哌嗪基苯乙酮溶解在濃硫酸中，混合物在90℃攪拌回流6-8小時，冷卻至室溫后將反應液倒入冰水中，繼續攪拌，所得沉淀過濾、洗滌、真空干燥得到黑色固體，即為7-(二乙氨基)-2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)高氯酸鉻；